Antpedia LOGO WIKI资讯

基因组印迹的分子机理

从目前研究结果来看,基因印迹的发生主要有以下两种机理: 一方面,研究发现,基因组印迹的分子机理与印迹基因DNA中胞嘧啶甲基化尤其是CpG岛的甲基化密切相关,胞嘧啶甲基化是DNA的一种共价修饰。另外还有特殊的染色质结构和反义转录产物等可能都是基因印迹产生和维持的重要因素。 基因印迹中,卵子和精子中对同一基因的不同程度的甲基化,几乎所有的印迹基因都有一些序列成份在两个不同亲本来源的等位基因中仅有一方是甲基化。这些序列被称为“差异甲基化区域“(Differentially Methylated Regions)。 它指基因组在传递信息的过程中,对基因或DNA片段打下标记或烙印的过程。 另一方面,组蛋白的修饰也被证实参与了基因组印迹(“Genomic imprinting beyond DNA methylation: a role formaternal histones”这篇文章中有详细的阐述)。......阅读全文

父系印迹影响配偶选择

  配偶选择是新物种产生的关键因素。对某一特定配偶的选择可以直接影响该物种的进化发展。德国马克思普朗克进化生物学研究所的科学家们近日用家鼠做实验来研究这一问题,并得出结论,父系印迹基因会加速这家鼠种群的分化,促进新物种的形成。   为研究择偶在物种形成过程中所发挥的作用,科学家分别在法国南部和德国西

什么是分子印迹技术

第八章 分子印迹技术将各种生物大分子从凝胶转移到一种固定基质上的过程称为印迹技术(blotting)。Southern在1975年首先提出了分子印渍的概念。他将琼脂糖凝胶电泳分离的 DNA片段在凝胶中进行变性使其成为单链,然后将一张硝酸纤维素(nitrocellulose, NC)膜放在凝胶上,上面

分子印迹分离技术概述

分子印迹分离技术是指获得在空间结构和结合位点上与某一分子(印迹分子)完全匹配的聚合物的过程。1、分子印迹分离技术的原理:当印迹分子与聚合物单体接触时会形成多重结合位点,通过聚合过程这种作用被记忆下来,当除去印迹分子后,聚合物中形成了与印迹分子空间结构完全匹配的具有多重结合位点的空穴,这样的空穴将对印

DNA印迹法的定义

Southern印迹法(Southern Blot)是将基因组 DNA经限制性内切酶酶解、琼脂糖凝胶电泳分离,使DNA片段按分子量大小排列在琼脂糖凝胶上。经碱处理凝胶使DNA变性(使双链DNA变成单链),通过具有一定盐离子浓度溶液的毛细管作用,将凝胶中变性的单链DNA片段原位地吸印到硝酸纤维素滤膜或

组织印迹的Western杂交

组织印迹的Western杂交 在硝酸纤维素膜上制备组织印迹 1.在塑料板上放置两层Whatman 1号滤纸,在滤纸上方放上一张普通纸,然后铺上一层硝酸纤维素膜。 2.用双面刀片从植物组织如大豆的茎上切取一块切片(厚度约为 1mm)。如果组织表面是湿的,则在Kimwipes纸上轻轻吸干

RNA 印迹法的概念

中文名称RNA 印迹法英文名称Northern blotting定  义将电泳分离的RNA从凝胶中转移到纤维素膜或尼龙膜上,用32P标记的RNA或DNA杂交进行检测的方法。主要用于检测目的基因的转录水平。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

什么是免疫印迹?

  免疫印迹(immunoblotting)又称蛋白质印迹(Western blotting),是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。该法是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。由于免疫印迹具有 SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏

斑点印迹的定义

中文名称斑点印迹英文名称dot blot定  义一种定性检测核酸或蛋白质的技术。即将待测核酸或蛋白点样于固相载体上,以同位素或非同位素标记探针与之杂交,通过显影或显色而进行检测。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(三级学科)

分子印迹技术的原理

  当模板分子(印迹分子)与聚合物单体接触时会形成多重作用点,通过聚合过程这种作用就会被记忆下来,当模板分子除去后,聚合物中就形成了与模板分子空间构型相匹配的具有多重作用点的空穴,这样的空穴将对模板分子及其类似物具有选择识别特性。

组织印迹的Northern杂交

组织印迹的Northern杂交1)硝酸纤维素膜或尼龙膜上的组织印迹1.在塑料板上放置两层Whatman 1号滤纸,在滤纸上方放上一张普通纸,然后铺上一层尼龙膜。2.用双面刀片从植物组织如大豆的茎上切取一块切片(厚度约为1mm)。如果组织表面是湿的,则在Kimwipes纸上轻轻吸干或先用蒸馏水洗涤几秒

免疫印迹法过程

免疫印迹法 是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。 1、SDS-PAGE试剂:见电泳实验。2、匀浆缓冲液:1.0M Tris-HCl(pH 6.8)1.Oml;10%SDS 6.0ml;β-巯基乙醇 0

DNA 印迹法的概念

中文名称DNA 印迹法英文名称Southern blotting定  义DNA经酶切和凝胶电泳分离后转移至尼龙膜或硝酸纤维素薄膜上,用探针进行杂交后分析目的DNA片段的方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

分子印迹技术的分类

  目前,根据模板分子和聚合物单体之间形成多重作用点方式的不同,分子印迹技术可以分为两类:  1.共价键法(预组装方式)  聚合前印迹分子与功能单体反应形成硼酸酷、西夫碱、亚胺、缩醛等衍生物,通过交联剂聚合产生高分子聚合物,用水解等方法除去印迹分子即得到共价结合型分子印迹聚合物。  2.非共价键法(

免疫印迹的优点

免疫印迹法是一项分析抗原、抗体的技术。它具有下列优点:1、 湿的固定化基质膜柔韧, 易于操作;2 、固定化的生物大分子可均一的与各种免疫探针接近, 不会象凝胶那样受孔径阻隔;3、 免疫印迹分析只需少量试剂;4、 孵育、洗涤的时间明显减短;5、可同时制作多个拷贝, 用于多种分析和鉴定;6、结果以图谱形

分子印迹技术的概况

  Southern在1975年首先提出了分子印渍的概念。他将琼脂糖凝胶电泳分离的 DNA片段在凝胶中进行变性使其成为单链,然后将一张硝酸纤维素(nitrocellulose, NC)膜放在凝胶上,上面放上吸水纸巾,利用毛细管作用原理使凝胶中的DNA片段转移到 NC膜上,使之成为固相化分子。载有DN

分子印迹分离技术概述

    分子印迹分离技术是指获得在空间结构和结合位点上与某一分子(印迹分子)完全匹配的聚合物的过程。1、分子印迹分离技术的原理:        当印迹分子与聚合物单体接触时会形成多重结合位点,通过聚合过程这种作用被记忆下来,当除去印迹分子后,聚合物中形成了与印迹分子空间结构完全匹配的具有多重结合位点

DNA印迹(Southern Blot)实验

【实验原理】DNA印迹是1975年由英国Southern创建的。其基本原理是:DNA分子经限制性核酸内切酶酶切后,由琼脂糖凝胶电泳将所得 DNA片段按分子质量大小分离,然后将DNA片段变性,并使凝胶中的单链DNA片段转移到尼龙膜、硝酸纤维素膜(NC)或其他固相支持物上,此法中DNA 片段

Western印迹法检测蛋白

实验概要Western印迹法检测蛋白的敏感性约为1-5ng,0.75mm厚的SDS-PAGE板的一个孔可上总蛋白量约为100μg,所以只要被检蛋白不低于总蛋白量的万分之一,即可被检测出来。如果所分析的样品为未知时,应同时作阳性对照。杂交技术主要有NC膜的封闭,靶蛋白与第一抗体的反应,结合靶蛋白的一抗

什么是western印迹技术

蛋白质经单向电泳后分离后被转移到硝酸纤维滤膜上,然后用放射性或酶标记的特异抗体来检测相应抗原的存在。蛋白质印迹技术是1975年Southern建立了Southern印迹法后,人们用类似的方法对蛋白质进行印迹分析,称为Western印迹法。Western印迹法是将获得的蛋白质样品通过SDS-聚丙烯酰胺

Western印迹法检测蛋白

实验概要Western印迹法检测蛋白的敏感性约为1-5ng,0.75mm厚的SDS-PAGE板的一个孔可上总蛋白量约为100μg,所以只要被检蛋白不低于总蛋白量的万分之一,即可被检测出来。如果所分析的样品为未知时,应同时作阳性对照。杂交技术主要有NC膜的封闭,靶蛋白与第一抗体的反应,结合靶蛋白的一抗

免疫印迹法的阶段

免疫印迹法分三个阶段进行.第一阶段为SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE):抗原等蛋白样品经SDS处理后带阴电荷,在聚丙烯酰胺凝胶中从阴极向阳极泳动,分子量越小,泳动速度就越快.此阶段分离效果肉眼不可见(只有在染色后才显出电泳区带).第二阶段为电转移:将在凝胶中已经分离的条带转移至硝酸纤维素

什么是反向免疫印迹?

中文名称反向免疫印迹英文名称reverse immunoblotting定  义一种用于分析抗体反应克隆性质的技术。即用等电聚焦法分离待测样品中各组分,再以电泳法转印至硝酸纤维素薄膜或其他材料上,加入同位素标记的抗原共温育,反应后用酶标记抗体与之结合,从而判定与之起反应的克隆性质和数量。应用学科免疫

DNA印迹法所需仪器试剂

仪器1电热真空干燥箱 2硝酸纤维素滤膜或尼龙膜 3大方瓷盘、带盖方盘、玻璃板 4滤纸、吸水纸、保鲜膜、蜡膜Parafilm、一次性手套等 5刀片、刻度吸管、镊子、剪刀、lkg重物 材料电泳分离DNA的琼脂糖凝胶试剂1 酸变性液:0.25mol/L HCl, 用分析纯的盐酸12Mol/L稀释 2碱变性

DNA印迹法实验凝胶处理

  1)凝胶照相后切去包括标记带在内的多余部分。将凝胶的一角(·点第一个样品的一侧)切去作为标记 以便于定位。精确测量凝胶大小然后将凝胶放入一个方形瓷盘中 。  2)变性:将凝胶浸泡于适量的碱变性液中,室温下变性30分钟。期间更换变性液一次,不断地轻轻摇动。如果先进行酸变性酸变性,则凝胶中溴酚兰的颜

DNA 印迹法的技术特点

中文名称DNA 印迹法英文名称Southern blotting定  义DNA经酶切和凝胶电泳分离后转移至尼龙膜或硝酸纤维素薄膜上,用探针进行杂交后分析目的DNA片段的方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

全自动蛋白印迹仪

全自动蛋白印迹仪,产品性能结构及组成该产品主要由控制部分、样本槽、加样通道、配套用瓶、吸入及加样泵组成。

蛋白质印迹实验

从SDS凝胶上转移蛋白质 从琼脂糖凝胶上转移蛋白质 从等电聚焦凝胶上转移蛋白 检测             试剂、试剂盒

免疫印迹实验相关原理

免疫印迹用于鉴定能够与特异性抗体相互作用的大分子抗原(一般为蛋白质)并测定抗原的大小。蛋白质首先通过SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,再通过电泳转移到固相支持物上,固相支持物包括硝酸纤维素膜,聚偏乙烯二氟(PVDF)膜和阳离子尼龙膜等。首先把膜上未反应的位点封闭起来以抑制抗体的非特异性吸附,这样固定的蛋

印迹法植物气孔检测实验

实验方法原理把有机溶胶涂在植物的表面,胶体风干后就凝成薄膜,这膜就印有表皮组织各细胞的边界痕迹,从而显示出气孔的开闭情况,此法除用来观测气孔外,还可用于观测表皮组织上的细胞,茸毛以及蜜腺、蜜盘、刺、鳞片等。实验材料植物叶片试剂、试剂盒脱脂棉牛皮胶甲苯石蜡仪器、耗材显微镜目镜测微尺载玻片盖玻片磨口玻璃

DNA印迹法的技术原理

这种方法最初是由Southern于1975年建立的。方法中DNA转移的方式和复印的过程一样,比较准确地保持了特异DNA顺序在电泳图谱中的位置,也可将变性的凝胶负压干燥后与特定的DNA探针进行原位杂交。它把电泳分离和杂交结合起来,不但能检测出特异的DNA序列片段,而且能进行定位和测定分子量。即先以电泳