火箭免疫电泳实验的操作步骤

1、抗原、抗体浓度的选择以分别固定抗原含量与抗体浓度的方法,选取最小抗原量与最低抗体浓度,在免疫电泳后能出现最清晰项端狭窄且尖的锥形沉淀峰,长达2~5cm者为标准。一般抗原用量为0.5~5微克,抗血清用量为5~10微升,稀释度于1:10~1:200之间进行选择。2、预复琼脂玻板的制备将溶化的1%预复琼脂用滴管加玻板上,使之能将表面覆盖即可,放于温箱内干燥(或自然干燥),即可用以制备凝胶板。3、抗血清琼脂板制备根据上述选择结果,取一定量抗血清与一定量融化并冷却至56℃的1.5%巴比妥缓冲琼脂混合,使抗血清的浓度为以上述方法选择出的最适浓度,浇制抗血清琼脂板。琼脂厚度为1~2mm,玻板大小可根据实验所需而确定。如用5×7.5cm大小玻板时,约需抗血清琼脂6ml.4、打孔、加样待琼脂凝固后,于距玻板一长边10mm处,以3mm孔径打孔器打孔一排,孔距5mm.于各孔中加入抗原液,每孔10微升。每次实验中应加入几个不同浓度的标准抗原以作对照......阅读全文

腺苷的实验操作步骤

1、标准曲线的绘制精密吸取上述对照品溶液2.0、4.0、6.0、8.0、10.0μL注入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外检测器检测器,于260nm检测腺苷的吸收值,以腺苷的进样量对其峰面积绘制标准曲线,进行线性回归,得到回归方程。2、供试品的测定精密吸取上述供试品溶液10μL,注入高效液相色谱仪,

IHC-实验操作步骤

            免疫组化方法(石蜡切片)*重要提示:参考抗体说明书选用合适的抗体稀释液和抗原修复处理方法。IHC 方法:抗原修复缓冲液/抗体稀释液A.     所需溶液和试剂1. 二甲苯2. 无水乙醇(100% 和 95%,变性无水乙醇,组织学级)3. 去离

免疫电泳实验技术原理和操作方法

(一)原理免疫电泳是琼脂平板电泳和双相免疫扩散两种方法的结合。将抗原样品在琼脂平板上先进行电泳,使其中的各种成分因电泳迁移率的不同而彼此分开,然后加入抗体做双相免疫扩散,把已分离的各抗原成分与抗体在琼脂中扩散而相遇,在二者比例适当的地方,形成肉眼可见的沉淀弧。该方法可以用来研究:①抗原和抗体的相对应

火箭电泳实验

实验方法原理在电场作用下,抗原在含定量抗体的琼脂介质中泳动,二者比例在合适时在较短时间内形成状似火箭或锥形的沉淀线,而此沉淀线的高度常与抗原量成正比关系,因此本法可以测定样品中抗原的含量。实验材料待检血清试剂、试剂盒巴比妥缓冲液琼脂粉仪器、耗材微量进样器打孔器玻璃板电泳仪实验步骤1.  抗体琼脂板的

火箭电泳实验

火箭电泳实际是一种定量免疫电泳。其原理为:在电场作用下,抗原在含定量抗体的琼脂介质中泳动,二者比例在合适时在较短时间内形成状似火箭或锥形的沉淀线,而此沉淀线的高度常与抗原量成正比关系,因此本法可以测定样品中抗原的含量。一、材料1. 诊断血清(抗体):抗人IgG或IgA免疫血清。2. 待检血清(抗原)

火箭电泳实验

实验方法原理 在电场作用下,抗原在含定量抗体的琼脂介质中泳动,二者比例在合适时在较短时间内形成状似火箭或锥形的沉淀线,而此沉淀线的高度常与抗原量成正比关系,因此本法可以测定样品中抗原的含量。实验材料 待检血清试剂、试剂盒 巴比妥缓冲液琼脂粉仪器、耗材 微量进样器打孔器玻璃板电泳仪实验步骤 1.  抗

详述蒸馏实验的操作步骤

  加料:把待蒸馏液通过玻璃漏斗小心倒入蒸馏瓶中,要注意不使液体从支管流出。加入几粒助沸物,安好温度计,温度计应安装在通向冷凝管的侧口部位。再一次检查仪器的各部分连接是否紧密和妥善。  加热:用水冷凝管时,先由冷凝管下口缓缓通入冷水,自上口流出引至水槽中,然后开始加热。加热时可以看见蒸馏瓶中的液体逐

免疫电泳实验

溶液的准备 倒胶 打孔与加样 电泳 检测             试剂、试剂盒 Tris-巴比妥缓冲液

免疫电泳实验

试剂、试剂盒 Tris-巴比妥缓冲液贮液电极缓冲液琼脂糖溶液实验步骤 1. Tris-巴比妥缓冲液贮液2.24 g 二乙基巴比妥酸,4.43 g Tris,0.053 g 乳酸钙,0.065 g 叠氮钠,用双蒸水溶解后,在容量瓶中定容至 100 ml。2. 电极缓冲液用双蒸水稀释 4 倍。3. 1%

免疫电泳实验

实验方法原理 免疫电泳的基本原理是将电泳和琼脂免疫扩散结合起来应用,即先将蛋白质抗原在琼脂内进行电泳,使分离成不同的电泳区带,然后在一定距离的抗体槽内加入抗血清,使进行免疫扩散沉淀反应,这样,每一电泳区带又可能产生一个以上的沉淀线条。因而此法克服了单纯琼脂扩散方法中的沉淀线重叠成束,不易鉴别的缺点,

免疫电泳实验

实验方法原理免疫电泳的基本原理是将电泳和琼脂免疫扩散结合起来应用,即先将蛋白质抗原在琼脂内进行电泳,使分离成不同的电泳区带,然后在一定距离的抗体槽内加入抗血清,使进行免疫扩散沉淀反应,这样,每一电泳区带又可能产生一个以上的沉淀线条。因而此法克服了单纯琼脂扩散方法中的沉淀线重叠成束,不易鉴别的缺点,大

火箭免疫电泳法测定补体C4、B因...

1、主要试剂 (1)羊抗人C4抗血清 按说明书所示单扩效价扩大2-4倍稀释,或分别用含不同浓度抗体的琼脂糖凝胶浇板,选择峰高、清晰度适当的抗体浓度为最适工作浓度; (2)羊抗人B因子抗血清 按说明书所示单扩效价扩大3-5倍稀释,也可按选择C4抗血清稀释浓度的方法确定最适工作浓度;(3)电泳缓冲液 称

对流免疫电泳的操作

  1.制琼脂板 以pH8.6离子强度0.05巴比妥缓冲液配成1%~1.5%琼脂凝胶板,厚度2mm~3mm.  2.打孔 琼脂冷却后,按图打孔,打成对的小孔数列,孔径0.3cm~0.6cm,孔距0.4cm~1.0cm.挑去孔内琼脂,封底。  3.加样 一对孔中,一孔加已知(或待测)抗原,另一孔加待测

氯米酚实验的操作步骤

  月经来潮或黄体酮撤药性出血蒂5日开始,每日口服氯米酚50-100mg,连服5日,子啊服药第1,3,5日清晨空腹时测FSH、LH,第3周或经前抽血孕酮。

化学发光实验的操作步骤

1、将A和B两种试剂在保鲜膜上等体积混合;1min后,将膜蛋白面朝下与此混合液充分接触;1min后,将膜移至另一保鲜膜上,去尽残液,包好,放入X-光片夹中。2、在暗室中,将1×显影液和定影液分别倒入塑料盘中;在红灯下取出X-光片,用切纸刀剪裁适当大小(比膜的长和宽均需大1cm);打开X-光片夹,把X

细胞有丝分裂的实验操作步骤

细胞有丝割裂指数(mitotic index,MI)是指归于割裂期的细胞占总细胞数的百分率.用于表明细胞增殖旺盛的程度,也可用于检查药物对细胞增殖能力的影响。用盖玻片培育法培育细胞,做固定和染色后,镜下调查和计数1000个细胞中处于割裂期的细胞数并核算MI。(一)材料1.待检资料(药物)。2.细

测定细菌的大小实验操作步骤

1.测微尺的构造 显微镜测微尺是由目镜测微尺和镜台接物测微尺组成,目镜测微尺是一块圆形玻璃片,其中有精确的等分刻度,在5mm刻尺上分50份(图14一lC)。目镜测微尺每格实际代表的长度随使用接目镜和接物镜的放大倍数而改变,因此在使用前必须用镜台测微尺进行标定。镜台测微尺为一专用中央有精确等分线的

化学发光实验的操作步骤

1、将A和B两种试剂在保鲜膜上等体积混合;1min后,将膜蛋白面朝下与此混合液充分接触;1min后,将膜移至另一保鲜膜上,去尽残液,包好,放入X-光片夹中。2、在暗室中,将1×显影液和定影液分别倒入塑料盘中;在红灯下取出X-光片,用切纸刀剪裁适当大小(比膜的长和宽均需大1cm);打开X-光片夹,把X

蒸馏法的实验操作步骤介绍

  加料  将待蒸馏液通过玻璃漏斗小心倒入蒸馏瓶中,要注意不使液体从支管流出。加入几粒助沸物,安好温度计。再一次检查仪器的各部分连接是否紧密和妥善。  加热  用水冷凝管时,先由冷凝管下口缓缓通入冷水,自上口流出引至水槽中,然后开始加热。加热时可以看见蒸馏瓶中的液体逐渐沸腾,蒸气逐渐上升。温度计的读

免疫电泳实验_检测

检测 试剂、试剂盒 Tris-巴比妥缓冲液贮液电极缓冲液琼脂糖溶液 实验步骤 如用考马斯亮蓝染色,先用生理盐水洗去没有反应的蛋白。为了加速染色步骤,将凝胶压干。(将凝胶放在玻璃板上,先用蒸馏水湿润。在小孔中注入双蒸水,以防止凝胶压扁时,小孔中的空气使凝胶破裂。用一张湿滤纸和

免疫电泳实验_电泳

试剂、试剂盒Tris-巴比妥缓冲液贮液电极缓冲液琼脂糖溶液实验步骤电泳时温度可控制在 10~15℃,同前述电泳的方法一样,先在冷却板上铺一层煤油,再铺胶。电极芯与凝胶的边缘接触 5~10 mm,并保持平行,电泳时的电场强度约为 20 V/cm。

免疫电泳(immunoelectrophoresis-)实验

免疫电泳(immunoelectrophoresis )是将电泳和琼脂扩散结合起来,用于分析抗原组成的一种定型方法,具有灵敏快速的优点。该实验可分为如下两个步骤:1.电泳 将待检的可溶性物质在琼脂板上进行电泳分离。由于各种可溶性蛋白分子的大小、质量与所带电荷不同,在电场的作用下,其带电分子的运动速度

微量免疫电泳实验

实验方法原理免疫电泳法(immunoelect rophoresis)是把蛋白质电泳分离技术(琼脂电泳)和免疫学检测技术(双向扩散)结合起来的检测法。此法在微量的基础上具有分辨率高,灵敏度高, 时间短等优点, 是很理想的分离和鉴定蛋白质混合物的方法。用于抗原、抗体定性及纯度的测定。在临床诊断方面也有

微量免疫电泳实验

实验方法原理 免疫电泳法(immunoelect rophoresis)是把蛋白质电泳分离技术(琼脂电泳)和免疫学检测技术(双向扩散)结合起来的检测法。此法在微量的基础上具有分辨率高,灵敏度高, 时间短等优点, 是很理想的分离和鉴定蛋白质混合物的方法。用于抗原、抗体定性及纯度的测定。在临

视频:ELISA实验操作步骤演示

优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA 检测结果准确可靠的必要条件。ELISA 的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式ELISA。以下是一份操作视频演示。ELISA实验操作步骤演示

密封试验仪实验操作步骤

试验操作将压缩气管接入仪器将仪器自配的6 mm管接入真空罐把适量水加入到真空罐中(罐内水位高于多孔压板上10 mm左右) 打开电源开关设置时间和压力时间设置“m” (或“s” 或“h” )左边为整数部分,右边为小数部分,“压力”中P3为实际需要值;︱P1︴=︱P3︴-1;P2,P4不更换为仪器的出厂

Western-Blot-Protocol实验操作步骤

一、提取抗原蛋白 将提取RNA途中留存的样品,加入150μl100%酒精充分混匀,静置  5min(RT),2000×g,4℃离心5min,吸取上清至新管中,加入750μl异丙醇,混匀,静置10min(RT),12000×g,4℃离心  10min,弃上清,加入1ml0.3mol/L盐酸胍/95%酒

原位杂交实验操作步骤

一质粒制备1质粒的转化和扩增1.1制备XL1-Blue感受态细菌1.取400uLXL1-Blue菌种加入到含200mllb培养基的锥形瓶中,37℃、100rpm培养4h,离心,倒置,以冰冷的0.1mol/LCaCl_2重悬细菌,冰浴30min,离心,弃上清,倒置,再加4ml(含15%甘油)冰冷的Ca

Northern-blot实验操作步骤(2)

二、将变性RNA转移至硝酸纤维素滤膜电泳完毕后,可立即将乙醛酰RNA自琼脂糖凝胶转移至硝酸纤维素滤膜,有以下几种转移方法:毛细管洗脱法、真空转移法和电印迹法。毛细管洗脱法如下所述, 真空转移法和印迹法则按有关仪器生产厂家产品说明书进行。尽管有人认为在转移前对琼脂糖凝胶进行预处理实属不必(Th

Northern-blot实验操作步骤(1)

一、经乙二醛和二甲基亚砜变性处理后进行的RNA电泳这一方法原于McMaster和Carmichael(1977)。含有乙二醛-DMSO的凝胶比含有甲醛的凝胶更难于进行电泳,因为前者泳动速率较慢而且需将电泳液时行循环以避免电泳过程中形成过高的H+梯度。尽管上述两种凝胶具有近乎相等的分辨率(Miller