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iPS重编程2014年新品盘点

iPS技术能够通过重编程令成体细胞重新获得多能性,iPS细胞理论上可以分化成为任何类型的细胞,在疾病研究、药物筛选和细胞治疗中有很大的应用前景。iPS研究热潮推动着整个产业快速发展,市面上的iPS工具可以说是日新月异,让我们看看今年都有哪些新产品面世吧。 自我复制的RNA iPS需要在体细胞中表达四种转录因子,这些因子一同逆转细胞时钟,生成了类似胚胎的多能干细胞。在传统方案中,这些因子是通过逆转录病毒或慢病毒载体递送的。后来人们又开发了DNA质粒、mRNA、仙台病毒等新递送体系。 不过上述递送方案都存在不足之处。逆转录病毒和慢病毒会整合到宿主基因组中,仙台病毒难以从培养物中清除,mRNA不够稳定需要连续多天反复转染,而质粒可能引起有害的基因组修饰,不适合某些临床应用。 “目前iPS领域的趋势是,用更安全的非病毒方法取代基于病毒的递送策略,”EMD Millipore 公司的产品经理Nick Asbrock说。 20......阅读全文

无血清培养基

    无血清培养基(serum free medium,SFM):是不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间生长繁殖的合成培养基。但是它们可能包含个别蛋白或大量蛋白组分。虽然基础培养基加少量血清所配制的完全培养基可以满足大部分细胞培养的要求,但对有些实验却

细胞培养板的选择与常见问题解答(一)

细胞培养板依底部形状的不同可分为平底和圆底(U型和V型);培养孔的孔数有6、12、24、48、96、384、1536 孔等;根据材质的不同有Terasaki板和普通细胞培养板。具体选择时根据培养细胞的类型、所需培养体积及不同的实验目的而定。(1)平底和圆底(U型和V型)培养板的区别和选择:贴壁细胞一

智能恒温摇床的选购

恒温摇床大致可分为水浴恒温摇床和气浴恒温摇床。水浴恒温摇床可分为常温水浴恒温摇床(室温~100℃)和冷冻水浴恒温摇床(常用为0~100℃,也可定制更低温度的如:-10℃~100℃)。在运行方式上可分为往复式、回旋式和双功能水浴恒温摇床。气浴恒温摇床也可分为常温恒温摇床和冷冻恒温摇床。常温气浴恒温摇床

单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb)的生产

获得稳定的杂交瘤细胞系后,即可根据需要大量生产单抗,以用于不同目的。 一、单抗的大规模制备 目前大量制备单抗的方法主要有两大系统,一是动物体内生产法,这是国内外实验室所广泛采用;另一是体外培养法。 1、动物体内生产单抗的方法 迄今为止,通常情况下均采用动物体内

原代细胞培养在药物测试的使用与注意事项

长期以来,科学家多依赖永生化的细胞系来进行各种研究,但在过去十年,随着细胞生物学的发展,细胞培养领域发生了巨大变化,新型的技术和培养试剂让使用原代细胞作为研究对象成为可能。相比于细胞系,原代细胞更多保留了体内原始组织的生物学特征,如生长和衰老,因此通过原代细胞可建立更好的细胞疾病模型。 原

细胞培养板的选择和使用

一、细胞培养板细胞培养板作为培养细胞的一种常用和重要的工具,形状、规格、用途多样。你是否也为如何选择适合的培养板而迷茫?你是否正为如何方便、正确使用培养板而苦恼?你对如何处理培养板是否也有困惑?对不同的培养板各有什么妙用你又有何体会?二、细胞培养板的选择1)细胞培养板依底部形状的不同可分为平底和圆底

细胞培养板的选择和使用问题集锦-1

细胞培养板作为培养细胞的一种常用和重要的工具,形状、规格、用途多样,你是否也为如何选择适合的培养板而迷茫?你是否正为如何方便、正确的使用培养板而苦恼?你对如何处理培养板是否也有困惑?对不同的培养板各有什么妙用你又有何体会?细胞培养板的选择:细胞培养板依底部形状的不同可分为平底和圆底(U型和V型);培

三维细胞培养技术及其相关载体的研究进展及应用(一)

经3D细胞培养支架培养的骨髓间冲质干细胞图片--复蒙基因 自WillhelmRoux于1885年从鸡胚中分离细胞首次建立体外细胞培养, 单层细胞培养技术已有百余年的历史。一个多世纪以来,单层细胞培养有了蓬勃的发展, 特别是在制药或者疫苗合成等产业化领域, 通过细胞的快速分裂,从而高

三维细胞培养技术及其相关载体的研究进展及应用(二)

2.3 人工合成高分子材料人工合成高分子材料可以通过分子设计等手段精确的控制其性质,也可以通过化工生产得到大批量性质基本相同的产品。相对于天然材料,更利于进行标准化的生产,力学强度也较好,但是生物相容性还有待提高,目前比较常用的办法是通过表面修饰在材料表面引入生物活性因子。合成高分子材料包括聚乳酸(

赛默飞世尔科技亮相2009国际生化大会

  推出全新系列产品方案 引领生命科学技术创新   2009年8月3日,中国上海—第21届国际生物化学与分子生物学联盟学术大会暨第12届亚洲大洋洲生物化学家与分子生物学家学术大会(以下简称国际生化大会)于昨日起至8月7日在上海国际会议中心召开。全球科学服务领域的领导者赛默飞世尔科技(纽约证交所代码

杆状病毒-昆虫细胞表达系统

实验步骤 一、杆状病毒表达载体 最简单的经典杆状病毒表达载体是一个重组的杆状病毒,其基因组含有一段外源核酸序列,通常为编码目标蛋白质的dDNA,在多角体蛋白启动子控制下进行转录。这个嵌合的基因由多角体蛋白启动子和外源蛋白编码序列组成

林金明:CM-MS为细胞研究提供新工具

  分析测试百科网讯 中国有句古话,“工欲善其事,必先利其器”,在细胞分析方面的意义则是为了阐明细胞的生命过程,需要特殊的工具。细胞作为生命组成的基本单位,了解其相关的生物行为及其规律与本质,对于揭示生命的奥秘,探索疾病的机理与治疗手段,提高人类的生存寿命与质量,都有着十分重要的意义。  细胞的研究

NK细胞培养存在的问题与解决方法

自然杀伤细胞(natural killer cell,NK)是机体重要的免疫细胞,不仅与抗肿瘤、 抗病毒感染和免疫调节有关,而且在某些情况下参与超敏反应和自身免疫性疾病的发生。目前,NK细胞培养存在两种培养方式:1、滋养层细胞(人肿瘤细胞,即人白血病K562细胞)培养方式。首先获得具有不分裂不增殖但

从标准化、规模化、产业化谈细胞治疗

  1、什么是细胞治疗?  细胞治疗是指将正常或生物工程改造过的人体细胞移植或输入患者体内,新输入的细胞可以替代受损细胞、或者具有更强的免疫杀伤功能,从而达到治疗疾病的目的。细胞治疗在治疗癌症、血液病、心血管病、糖尿病、老年痴呆症等方面显示出越来越高的应用价值。一般来讲,细胞治疗包括肿瘤细胞免疫治疗

细胞不贴壁、生长缓慢怎么解决?

在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题,这些问题从细胞生长角度来说,针对细胞不贴壁、生长缓慢、生长不好,甚至死亡的原因,我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞不贴壁可能原因: •胰蛋白酶消化过度;•支原体污染;•培养基pH值过碱(NaHCO3分解);•细胞老化;•接种细胞起始浓

牛血清在细胞培养中的作用与质量要求

中国药品生物制品检定所 李德富研究员 生物技术已经被世界各国视为一种高技术,在整个科学技术中占据了特殊的显著地位,特别是生命科学的发展更离不生物技术,生命科学的发展备受各国的重视。我国在很多大学中都设立了生命科学院。现代生物技术一般认为包括基因工程技术、细胞工程技术、酶工程技术和发酵工程技

CO2 恒温摇床培养杂交瘤细胞及中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞

环保、 低耗气 New Brunswick S41i CO2 恒温摇床培养杂交瘤细胞及中国仓鼠卵巢(CHO) 细胞Nick Kohlstrom, George Wang, Linette Philip and Ma Sha, Eppendorf Inc., Enfield, CT, U.S.A.摘要

干细胞实验技术入门

《Science》刚刚公布的十大科学突破中,占据首位就是细胞重新编程技术(iPS,induced pluripotent stem cells),这一才初初“面世”一年的干细胞 技术引发了生命科学研究领域的极大震动,引用《科学》杂志负责新闻的副主编Robert Coontz的话就是“这项研

CHO细胞无血清培养入门技术手册

CHO细胞无血清培养入门技术手册——深圳百恩维生物1、CHO细胞背景CHO细胞是中国仓鼠卵巢细胞(Chinese Hamster Ovary,CHO),1957年美国科罗拉多大学Dr. Theodore T. Puck从一成年雌性仓鼠卵巢分离获得,为

细胞培养大攻略

一、细胞培养基础和步骤细胞培养基大全细胞原代培养步骤细胞传代培养步骤二、细胞培养常见问答1、加到培养基中的血清 必须灭活吗?答:不是必须的,看做什么实验了。2、四季青胎牛血清灭活是56 ℃30分钟吗?答:如果用于培养大多数的肿瘤细胞,血清一般是不需要灭活的,这样可以有效保存血清中的生长因子

CELLine生物反应器工作原理及特点

Wheaton的CELLine生物反应器采用细胞室与培养基室半透膜分离培养技术,突破了传统细胞培养的空气,营养物质,代谢抑制因子对细胞生长的制约。最大程度的模拟了细胞在有机体的生长环境。实现了高密度细胞培养,高浓度产物表达的培养目的。CELLine二室技术示意图CELLine 生物反应器是如果工作的

植物细胞大规模培养技术

植物细胞培养技术就是为了某种目的而在细胞水平上对离体植物细胞或原生质体进行的一系列生物工艺学操作。它包括分离、培养、再生以及一系列相关的操作。就有用化合物的生产来说,它主要是指在无菌条件下通过培养植物细胞生产有用化合物的过程。一、植物细胞培养的特性(1)植物细胞较微生物细胞大得多,有纤维素细胞壁.细

药物体外测试新进展:实时3D细胞培养和芯片器官

  仍面临挑战的体外培养新技术有望替代现有的、用于药物测试的模型动物,具有纪念意义的是,日前政府拥有的360只黑猩猩正式从药物测试中退役,研究人员相信体外新技术将来可应用于药物测试和生理生化研究。   更灵敏的体外技术新平台被开发出并应用于研究人体药物代谢,从而让动物从药物试验中解放出来。动物保护

如何挑选合适细胞的必备口粮——血清

在培养细胞的过程中,你是否遇到:本应贴壁的细胞,某次传代后出现不贴壁了?细胞养不起来,生长速度缓慢,或突然停滞生长?细胞状态不好,视野中总是存在较多死细胞? 想要知道如何才能把细胞养好,我们需要先明确培养细胞的3个关键要素:良好的细胞来源,严谨的实验操作,正确的培养体系。关于操作,其中存在

十二种无血清培养基的资料

㈠无血清培养基和试剂被广泛的应用于培养哺乳动物和无脊动物细胞以制备单克隆抗体,病毒抗原和重组蛋白等。大多数的无血清产品含有向细胞内转运离子的转铁蛋白和调节葡萄糖摄取量的胰岛素,以及一些蛋白质如清蛋白,纤连蛋白,胎球蛋白等,这些蛋白在细胞培养中发挥各种不同功能,如吸附毒性化合物,抗生物反应器剪切力,提

大规模的问题及对策-1

1、细胞培养环境细胞培养环境中抑制因素的积聚是提高细胞密度的主要限制因素。体外动物细胞培养中氨离子的积累是抑制细胞生长的主要因素之一。氨的积聚使细胞内UDP氨基己糖(UDP-N-乙酰葡糖胺和UDP-N-乙酰半乳糖胺)增加,影响细胞的生长及蛋白的糖基化过程。氨抑制Gln代谢途径,使Asp和Glu消耗增

原代细胞的培养与建系-1

                      原代细胞的培养与建系   细胞的来源多样,培养方法也各不相同,凡是来源于胚胎、组织器官及外周血,经特殊分离

大规模的问题及对策-2

用基因工程方法将bcl-2基因这种细胞凋亡抑制基因导入细胞,成为众多研究者的选择。bcl-2基因的过量表达能抑制Gln或氧缺乏引起的细胞凋亡,减少细胞特定营养成分的消耗,提高细胞密度和目的蛋白产量,这对于细胞大规模培养具有重大意义。对细胞的这种保护作用依赖于bcl-2等抑制基因的高水平表达。因此,需

细胞培养常见问答

细胞培养常见问答 1、加到培养基中的血清 必须灭活吗?   答:不是必须的,看做什么实验了。   2、四季青胎牛血清灭活是56 ℃30分钟吗?   答:如果用于培养大多数的肿瘤细胞,血清一般是不需要灭活的,这样可以有效保存血清中的生长因子 。但是如果用于培养一些表面具

动物细胞大规模培养的生物反应器

  动物细胞培养技术能否大规模工业化、商业化,关键在于能否设计出合适的生物反应器(bioreactor)。由于动物细胞与微生物细胞有很大差异,传统的微生物反应器显然不适用于动物细胞的大规模培养。首先必须满足在低剪切力及良好的混合状态下,能够提供充足的氧以供细胞生长及细胞进行产物的合成。  一、生物反