发布时间:2018-11-10 12:29 原文链接: PEG介导的动物细胞融合(cellfusion)技术

细胞融合(cell fusion)或细胞杂交(cell hybridization)是指真核细胞通过介导和培养,两个或多个细胞合并成一个双核或多核细胞的过程。人工的细胞融合开始于20世纪50年代, 60年代到70代作为一门新兴的技术, 发展非常快, 应用范围也极为广泛, 除了同种类细胞间可以融合, 种间远缘细胞也能融合, 细胞与组织不同, 不排斥异类、异种细胞, 动物细胞如此,植物细胞也是如此。基因型相同的细胞融合成的杂交细胞称为同核体(homokaryon);来自不同基因型的杂交细胞则称为异核体(heterokaryon)。

 

目前, 诱导细胞融合的方法有三种:病毒(Okada, 1958)、聚乙二醇(polyethylene glycol, PEG)(Pontecorvo, 1975)和电激(Zimermann, 1980s)。副粘病毒科的病毒,如副流感病毒(Sendai virus)和新城鸡瘟病毒,在其被膜中目前发现了两种糖蛋白。较大的一种具有粘附细胞和凝血的作用;较小的一种可介导病毒同宿主细胞融合, 也可诱导细胞与细胞融合,称为融合蛋白(fusion protein)。人工利用病毒诱导细胞融合即是利用病毒的这一特性, 使用时先用紫外线将病毒灭活, 稀释到一定浓度加入到细胞悬液中, 诱导细胞融合。但病毒介导细胞融合方法在使用前需要病毒的繁殖与灭活,操作繁琐,如灭活不完全则易对实验人员造成伤害,因此现在一般不使用此方法。后两种方法则是利用化学和物理手段,暂时使质膜脂类分子的有序排列发生改变,待去掉作用因素之后,质膜恢复原有的有序结构,在恢复过程中便有可诱导相接触的细胞发生融合。总之,这3种方法都是在相互接触的两细胞进行自我修复过程中融合的。

 

细胞融合不仅可用于生物学的基础理论研究,而且在生产实践上还有重要的应用价值,如目前在单克隆抗体的制备, 核质关系, 体细胞的遗传和发育, 新品种的培养, 免疫作用, 疾病的治疗和性状的改良, 潜伏病毒的研究等,已取得了显著的成绩。生物秀细胞实验论坛交流


实 验 目 的


1. 通过PEG介导的鸡血细胞融合实验, 对体细胞融合有一个清楚的概念

 

2. 并初步掌握利用PEG介导动物细胞融合的实验技术


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