应用慢病毒载体检测CRISPRCAS9和TALEN脱靶

　　近日，国际生物学期刊nature biotechnology在线刊登了美国科学家的一项最新研究成果，他们应用整合酶缺陷的慢病毒载体（IDLV）检测CRISPR-CAS9和TALEN对基因组造成的脱靶效应，最低可检测1%的脱靶频率。这项研究或对推广CRISPR-CAS9和TALEN技术，保证基因操作的准确性具有重要意义。

　　目前，CRISPR-CAS9和TALEN技术已经广泛应用在基因操作平台，但脱靶效应一直是科研人员应用这两项技术面临的最大担心和问题，脱靶会造成基因组的不稳定并会扰乱正常基因的功能。在之前的一些工作已经发现一些方法可以预测筛选脱靶位点，但这些研究方法都不能在体内很好匹配体外的预测结果,因此如何提高预测的准确性，优化预测方法成为推广应用CRISPR-CAS9和TALEN技术必须要解决的问题。

　　之前几个研究小组已经报道，双链IDLV能够通过非同源末端连接的方法特异性插入到基因组双链断裂DNA上，这种策略使体内标记核酸酶产生的双链断裂DNA成为可能，并被用于检测锌指核酸酶的脱靶切割位点。因此，Xiaoling Wang等人将IDLV用于衡量CRISPR-CAS9和TALEN的脱靶活性。

　　综上所述，该文章通过整合酶缺陷的慢病毒载体(IDLV)检测了CRISPR-CAS9和TALEN的脱靶效应，并对这两种技术的脱靶效应具有很高的检测效率。这项技术的应用或为推广CRISPR-CAS9和TALEN技术，保证基因操作的准确性起到重要推动作用。