《微生物检测与质量控制技术》论坛：小小微生物的重要性

　　分析测试百科网讯 微生物，是一群平时在我们生活中用肉眼不能看到的生物，他们形态各异，无处不在（除了特殊情况），生长速度非常快，只有通过显微镜，我们才能看清他们的庐山真面目。微生物与人类关系密切，例如我们平时用的抗生素，喝的酸奶都是微生物的产物，但是在某些时候，微生物却是我们的致命因素。尤其是在药品中，与我们的身体密切相关，微生物的检测与控制就显得尤为重要。

《微生物检测与质量控制技术》论坛现场

　　2015年8月12日，第三届全国制药企业质量控制技术论坛在北京召开，大会围绕着制药企业质量控制技术展开讨论。在下午的《微生物检测与质量控制技术》分论坛上，各位报告人结合2015版新修订的药典，针对新版药典的微生物部分提出了自己的看法，也对其中的某些步骤提出了指导性的意见。

青岛市食品药品检验中心原微生物室主任 杜平华

　　来自青岛市食品药品检验中心原微生物室主任杜平华给大家讲解了报告《2015新版药典微生物标准的修订》。杜平华主要介绍了微生物限度和无菌的标准要求及对比新版药典增修订的内容。微生物限度在新版药典增订了原料、辅料、中药提取物及饮片的微生物限度标准。并且以需氧菌总数取代细菌数，用来表示。杜平华还解释了限度标准的含义：10¹CFU：最大可接受限制=20；10²CFU：最大可接受现值=200；10³CFU：最大可接受现值=2000。而且以耐胆盐格兰阴性菌取代大肠杆菌。在作报告时，杜平华一再强调，关于这点我们不应理解为限度标准的放宽，而是因为微生物在样品中的分布和提取时的不均匀性会给结果带来不确定性。这关系到微生物计数实验的精密度。杜平华还对新版药典中的微生物限度标准作了解释。

浙江泰林生物技术股份有限公司生物技术研发部经理 赵振波

　　来自浙江泰林生物技术股份有限公司生物技术研发部经理赵振波讲了《如何应对2015版药典无菌检查要求的变化——风险预防和控制》。报告主要讲述了在新版药典微生物部分要求变化的情况下，从环境设备、材料、仪器、清洁卫生处理和消毒、过程控制和人员的方面对微生物进行严格的控制。

默克化工技术（上海）有限公司实验室分析部/市场部经理 李峰

　　默克化工技术（上海）有限公司实验室分析部/市场部经理李峰给大家带来了《新版药典检测培养基介绍及配制注意事项》。根据新版药典的6个检查法和6个指导原则，李峰给大家详细介绍了培养基的配制及保存方法。2015版药典微生物限度方面新增了胰酪大豆胨肉汤、胰酪大豆胨琼脂、沙氏葡萄糖琼脂、沙氏葡萄糖肉汤、马铃薯葡萄糖琼脂五种培养基。相应的无菌检查也将营养琼脂和营养肉汤换成了胰酪大豆胨和沙氏葡萄糖的培养基。接下来，李峰主要介绍了培养基的配制流程中的注意事项，对于培养基要进行质量控制，要从每批制备好的培养基中选取部分样品进行污染测试，还要使用质控菌检测培养基的生长能力，抑制能力和特异性。最后，李峰还介绍了默克在德国的培养基工厂。

中国药学微生物菌种保藏管理中心 张涛

　　中国药学微生物菌种保藏管理中心张涛给作了题为《微生物菌种鉴定、管理与质量控制》的报告。微生物菌种是微生物检测必要的比对物，所以实验中一份活力高、纯度高的微生物菌种是非常有必要的。张涛主要介绍了四种微生物鉴定的方法，基因型数据的方法（通过测定其中G+C含量或是DNA杂交）、生理生态形态学方法（显微镜观察）、生理生化特征方法（通过鉴定微生物图谱与菌种数据库比对）、细胞化学特征。鉴定之后还要选择合适的保藏方法以保证菌种的存活率。张涛主要介绍了4种方法：沙土保藏法、冷冻干燥保藏法、-80度低温冷冻法、液氮超低温保藏法。在保藏的时候，要特别注意控制降温的速率，注意使用保护剂，使用抗诱变剂和修饰剂以提高菌种存活率。

布鲁克应用技术支持 张欣怡

　　接下来的布鲁克应用技术支持张欣怡给大家带来一款高新技术微生物快速鉴定——MALDI Biotyper。MALDI Biotyper（基质辅助激光解析电离-飞行时间）质谱仪采集微生物独特的分子指纹图谱，从而对微生物进行鉴定。并通过与数据库中数千种微生物菌株的参考指纹图谱进行比对，实现微生物可靠且准确的鉴定。布鲁克的MALDI Biotyper有以下几大特点：1、操作简单、快速，样品测定时间只需20s，几分钟就可以出图谱；2、样品需求量少，0.25ng-0.5ug生物样品，单菌落即可；3、更快、更准、更省钱；4、适用面广泛，革兰氏阳性、阴性菌、酵母菌、丝状真菌等都可以；5、培养条件影响甚小；6、开放式数据库，用户可以自建数据库；7、实验室间重复性研究表明，布鲁克MALDI Biotyper重复性达到98.7%。目前，布鲁克MALDI Biotyper已应用于临床微生物，环境微生物，工业微生物。中国也有部分检验检疫局已应用。

诺和诺德（中国）制药有限公司微生物实验室 杜红梅

　　最后，诺和诺德（中国）制药有限公司微生物实验室杜红梅女士给大家带来了《欧洲药典/美国药典和2015版中国药典胰岛素无菌检查方法比对》。通过对欧洲、美国、日本等其他国家对胰岛素无菌检查方法的解读与比较，最后总结出对各药典中的无菌检查方法进行统一的优势：1、简化培养基促生长实验和无菌常规检查的分析流程；2、如果使用标准菌株来自ATCC，可以简化菌株准备操作程序；3、在进行了充分的风险评估，对患者不带来任何风险的基础上，降低无菌检查成本；4、根据验证分析，有些药典不同点是不增加患者风险的。