柑橘精油倍半萜类化合物——多级GC方法鉴别

　　精油

　　精油是从植物中提取出来的，用于健康、食品和化妆品工业，根据它们成分的不同，可以有不同的效果。它其中的一个很重要的成分就是倍半萜烯类碳水化合物，它们是一类有着相同化学式C10H16的化合物统称。在一种精油中有可能存在着上百种倍半萜烯类，所以不可避免的这也给成分鉴定带来了一定的麻烦。

　　传统的比较成功的检验精油的方法是GC/MS。然而，对于那些非常相似的化合物，很有可能在质谱普库中有好几个数据匹配。此外，还有那些保留时间非常相似的化合物，他们会从GC柱子里一起洗脱出来，这样会造成质谱图的重叠。

　　有一队意大利的研究人员在2013年提出了一个改进的方法，他们用HPLC作为前期的分离，更强大的GC技术分析结果百分比：二维GC串联四极杆质谱。这种2D造型可以提供更好的峰容量、选择性和灵敏度来使峰更好的分离。

　　现在，由同一支队伍，通过增加更多的GC技术研发了更先进的方法。从墨西拿大学和罗马大学的生物医药系来的Luigi Mondello和其合作研究的同事们将他们的更加全面的方法应用在柑橘精油的分析研究中。

　　基于HPLC的多重GC方法

　　从柠檬、香柠檬、甜橙、苦橘、潘丽雅红柑橘、葡萄柚、克莱门氏小柑橘和酸橙中提取出来的精油，现在是用新方法来进行分析的。第一步跟之前一样，使用RP-HPLC进行前期分离，每1.5-3分钟分离出一种物质，用UV检测器检测。

　　分离出的物质中的倍半萜类化合物用一维或者是二维的GC/MS串联四极杆质谱进行鉴别。第一根柱子用5%的二苯基聚硅氧烷覆盖，第二根柱子，在调制单元冷却之后进行安装，用100%的聚乙烯乙二醇覆盖。对于定量来说，同样的样品用一维和二维GC-FID用与GC/MS系统同样的GC柱子。

　　总共，所有精油中的375种化合物是用2D-GC/MS和GC-FID进行检测的，332种是用1D-GC/MS和GC-FID检测的。这些倍半萜类化合物可以用两种方法检测的有275种，这能说明在GC中额外的分离维度的好处。这样的改进更多的归属于冷冻调制2D-GC系统的灵敏度的提高而不是第二根柱子的额外增加的分离。

　　将来会有更多的实验在GC系统中使用冷注射而不是现在的高温注射。这样的选择可以阻止很多倍半萜类化合物的分解或者是重新组合，而且可以使得检测的化合物更准确。举个例子，冷注射揭露吉玛烯B在高温注射的情况下部分被分解，但是吉玛烯D却不会。

　　广泛的标志

　　对于所有已鉴定的倍半萜类化合物来说，只有5种在柑橘精油中是常见的，可见他们的化学多样性。这五种分别是α-荜澄茄油烯、α-可巴烯、反式石竹烯、反式-β-金合欢烯和α-律草烯。还有六种化合物在所有的精油中都能找到除了一种之外，但是其他的都只是存在于一种精油之中。很多的柑橘精油中的化合物已经在第一时间被鉴别出来了。

　　这个结果还可以证明精油成分在果物的生长过程中会发生改变。举个例子，柠檬精油，倍半萜类化合物在生长之初是最少的，在四月和五月逐渐增多，但是在整个过程中，化合物的比率几乎不变。

　　柠檬精油和香柠檬精油的香味差不多是一样的，酸橙的香味也跟它们的差不多。而且甜橙和克莱门氏小柑橘的成分配比度非常高，只有一点点的不同。

　　这些具体的比较，只有通过HPLC的分离出的物体再交由GC和GC/MS分析才能得出。这种二维的GC将会在精油中走的更远，找出更多的化合物和更多的复杂香味