第三军医大用CRISPR探讨肝癌性别差异

　　肝细胞癌（HCC）是一种最常见和恶性的肿瘤。HCC发病率在不同性别之间具有很强的差别，因为男性是这种疾病的主要受害者。虽然已有一些研究揭示了雄激素/雄激素受体(AR)轴和肝癌发病率之间的相关性，但是根本机制在很大程度上仍然是未知的。5月5日在国际著名期刊《Oncotarget》上发表的一项研究中，来自第三军医大学西南医院和重庆大学的研究人员利用CRISPR系统，对于雄激素/AR轴在HCC中的作用，提出了新的见解，并提供了一种潜在的方法，在HCC疗法中抑制这个轴。第三军医大学西南医院的梁志清教授和钱程教授，是本文共同通讯作者。

　　肝细胞癌（HCC）是最常见的一种癌症，具有很高的死亡率。事实上，有合理的科学证据表明，HCC的发病明显倾向于男性，而男性对女性的比例从2.5到11:1不等。一些研究支持雄激素/雄激素受体轴作为这种性别偏差的一个关键因素。雄激素受体(AR)是一个110 kDa的转录因子，被雄性激素激活后，它在调节靶基因的表达中发挥作用。有研究证明，这个轴参与多种癌症相关的过程，例如，通过TGFβ1或β-catenin途径分别促进癌细胞的生长和调节细胞周期，并参与细胞生长和FOXA1/2有关的增殖。然而，这个轴在肝癌发生性别差异中的根本机制，在很大程度上仍是未知的。

　　肿瘤干细胞（CSCs）是一小群癌细胞，具有自我更新、广泛扩散和强大的肿瘤发生的能力，一直被认为是癌症发展中的初始细胞。最近有研究表明，雄激素/ AR轴参与前列腺癌的CSCs调控。然而，这些影响是多向性的，我们对其复杂的机理仍然知之甚少，需要进一步调查。

　　在该研究小组之前的工作中，研究人员已经证明，多能性因子Nanog可能是HCC中一种可靠的CSCs标记。它也参与维持CSCs的干性（stemness）。虽然Nanog的下游调控网络已经被充分研究过，但是关于调节HCC中的Nanog的见解仍然有限。生物信息学分析显示，在Nanog启动子中有公认的AR结合位点。因此，该研究小组想知道，雄激素/ AR轴是否通过Nanog相关途径，对HCC细胞的干性维护产生影响。

　　在这项研究中，研究人员调查了雄激素/ AR轴对HCC细胞干性的影响，然后阐明了其背后的机制。为此，他们首先证明，比起癌旁组织，AR在肝癌组织中是高度表达的，并且雄性激素可以促进HCC细胞的干性。该研究小组还发现，Nanog的表达与肝癌组织中的AR是一致的。

　　然后，通过CRISPR/Cas9诱导的同源指导修复方法，用GFP标记HCC细胞中的内源Nanog，研究人员证明AR和Nanog 在这些细胞中是完全共定位的。进一步的数据表明，雄激素/ AR轴可以通过直接结合其启动子，增加Nanog的表达，并促进HCC细胞的干性和肿瘤发生。这种作用可以通过AR降解增强子或雄激素阻断而被抑制。

　　总而言之，这些研究结果显示，雄激素/ AR通过影响肿瘤细胞的干性，在肝癌发生过程中发挥一个全新的作用，并为HCC疗法中的这个轴抑制提供了证据。