一、移液枪使用诀窍
移液枪是实验操作上不可缺少的工具,对于顶尖高手而言,重要的就是实验的误差最小,重复再现性好,那就要注意正确移液枪使用。
1. 影响移液枪精度因素
(1)温度:室温低时,手温较高,使得空气膨胀,吸入冷溶液时往往发生误差
(2)气密性:tip和枪体的结合部,以及枪内柱体之间的长期磨损,造成误差
(3)吸速:容易造成tip内气泡产生,而且会污染枪头
(4)试剂的挥发:吸挥发性高的试剂时,蒸汽进入枪头,内压增高,结果在压出液体时,压力变大,而产生误差。解决办法:反复抽吸4-5次就可改善。
2. 具体使用方法
更换tip法:最精确。
(1)调节旋钮到所需刻度位置,诀窍:首先可略超过一些,再回旋至刻度。注意禁止超过最大刻度,避免人为误差。
(2)插上tip:无菌操作时,要注意动作迅速正确,不能用手碰tip,动作的力度要保持一致,禁止废动作。普通操作时,可用拇指食指上紧,但手不能碰tip尖端处。
(3)指压到第一段,tip尖端接触试剂。白色tip进到液面1 mm一下,黄色tip 2-3 mm,蓝色tip2-4 mm,避免液压的影响造成的误差。
(4)缓慢吸试剂,禁止速度过快,液体进入枪头。
(5)移出tip后,先在容器内壁轻轻靠住,使tip外壁液体流下。
(6)将tip贴在目标容器内壁,轻轻按到第一段,压出液体。
(7)tip 尖端在容器内壁略上滑动,保留尖端少量液体,移出目标容器,手指卸掉 tip,注意不要使试剂溅出。
一只tip分注法:不适用于挥发性,有毒性试剂。
(1)同上述A-D,移出液面后,先缓慢按到第一段,在用力按到第二段,将试剂全压出。
(2)同上述C,缓慢吸出液体。
(3)在目标容器液体上空,压出试剂到第二段,注意压的力度要和A相同,还应注意试剂不要四处飞溅。
(4)缓慢返回第一段,可重复上述操作。达到目标容器原有液体不污染tip的目的。
转移数ul的贵重试剂时的方法:
(1)同上述A-D,移出液面后,在容器内壁轻按几下,使外壁液体流下。白色tip进到液面1 mm以下,这最重要。
(2)tip尖端浸入目标容器的液面下,缓慢压到第一段。
(3)松开,返回到第一段,重新吸入液体,反复4-5次,,洗净tip内壁液体。
(4)将tip 尖端移出液面,在内壁轻轻靠住,压出液体到第二段。
二、移液六部曲
1. 装吸头
移液器套柄用力下压,需要时小幅度旋转即可。
错误操作:用力敲击吸头。此方法会带来吸头损坏甚至移液器套柄磨损,从而影响其密封性。
2. 量程设定
操作之前请先选择正确的移液器,移液器可在10-100%量程范围内操作,但在10%量程处操作对于移液技巧要求高,故推荐在35-100%量程范围内操作。
量程调节:当由小量程调节至大量程时,朝所需量程方向连贯旋转,旋转到达超过所需量程1/3圈处再回调至所需量程。当由大量程调节至小量程时,直接连贯旋转至所需量程。
3. 润洗
用同一样品重复吸液排液二至三次,润洗为以后每次吸液提供相同的接触面,保证操作的一致性。
注意:高温或者低温液体请不要润洗!
4. 吸头浸入角度
吸液时尽量保持垂直状态,倾斜角度不能超过20°。
5. 吸头浸入深度
6. 吸头浸入时间
吸液后在液面中保持一秒钟再将吸头平缓移开,这对于大容量移液器或者吸取粘性样品尤为重要。
7. 吸液速度
匀速连贯移液,控制好移液速度,太快会造成喷液,液体或者气雾冲入移液器内部,污染活塞等部件。
8. 排液及吹液
先将活塞按至第一档排液,略作停顿后按至第二档进行吹液。
排液四种方式:
9. 手温
移液器不宜长时间握在手里,不用时最好将其挂在支架上或者挂在手上晾一下。
三、移液枪打油诗
移液枪是公家买
科学使用要记牢
马马虎虎用坏枪
实验停滞心发毛
用枪之前看量程
这个原则很重要
拧过量程不允许
界限之内随你调
酚仿抽提最坏枪
吸后枪头要打掉
枪头不扔且不说
倒置枪身更傻冒
枪身本是塑料造
氯仿腐蚀完蛋鸟
EB是强烈致癌物
吸取本应戴手套
奈何忘乎所以者
戴着手套把枪抱
EB因此四处污染
害人害己不知道
用完量程调最大
一把枪能用到老
遵守规范是公德
美丽环境大家造
By ZhuLu 2005.2
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