Thermo U3000 液相色谱操作规程

一、
仪器操作
1. 准备工作
1) 检查管道氮气、流动相流路与压力是否正常。如不合适请调整气路、气
源与流动相流路。
2) 检查实验室环境，包括温度、湿度等是否正常。温度保持在21-25 oC，；
湿度保持在70%以下。如不合适请联系相关维修人员
3) 确认各流动相瓶内溶液体积大于瓶体积50%；有机流动相使用HPLC级
与HPLC级以上的乙腈与甲醇；离子对添加剂使用HPLC级与HPLC级以上的甲酸、甲酸铵、乙酸铵等；高纯水存放时间不超过一周。 4) 流动相中仅能加入5 mM浓度以下的挥发性缓冲盐，如甲酸铵、乙酸铵
等。
5) 所有新配置的流动相均充分混匀后在超声10分钟，排除气泡。 2. 开机过程：
1) 打开电脑进入windows的桌面。 2) 打开液相各个模块的电源（没有顺序）。
3) 打开氮气管道开关阀，确证压力指示在0.3 Mpa。 4) 打开变色龙服务器软件，点击连接数据传输。 5) 打开变色龙色谱工作站。
6) 在Create Program窗口中编辑液相方法并保存。 7) 打开液相色谱流路，平衡液相系统。 8) 点击进样按钮开始进样。 
3. 待机过程：
1) 待机前，将色谱流动相流路切换至90%乙腈水溶液，以0.3 mL/min流速
冲洗色谱柱20分钟。
2) 在5分钟内将色谱流速从1 mL/min 缓慢降至0 mL/min。 3) 关闭柱温箱加热功能，关闭CAD检测器氮气气路。

4. 长假关机过程：
1) 关闭液相色谱各模块的加热功能 2) 关闭流动相流速。 3) 关闭所有软件和电脑。 4) 关闭液相所有模块的电源。 5) 关闭氮气减压阀。 6) 关机结束。  二、
仪器维护
1. 做完实验：使用纯水、纯乙腈冲洗色谱管路； 2. 关闭紫外检测器，关闭柱温箱的加热功能。 3. 废气与废液排放空间通畅；  三、
液相可能存在的问题与排查方法
1. 可能存在的问题
1) 灵敏度突然间降低 2) 空白溶液背景很高 2. 排查方法
1) 检查流动相是否新鲜配置
2) 检查各个温度，气体流速，流动相流路 3) 检查进样系统是否正常工作 4) 检查紫外检测器是否工作正常 5) 检查色谱柱是否堵塞，是否漏液