摘要: 荧光分光光度法是对荧光物质进行定性和定量的有效方法。目前国家标准对于测定食品中维生素C含量的方法以荧光分光光度法为主。
本文以婴幼儿乳品为例,依据国家标准GB 5413.18-2010《食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中维生素C的测定》,应用港东F-380型荧光分光光度计对婴幼儿乳品中维生素C的含量进行测定。结果证明此方法操作简便,线性良好是测定食品中维生素C含量的理想方法。
关键词: 荧光分光光度法 维生素C 抗坏血酸 食品 婴幼儿乳品
点击查看相关产品:F-380荧光分光光度计
· 原理
维生素C(抗坏血酸)在活性炭存在下氧化成脱氢抗坏血酸,它与邻苯二胺(OPDA)反应生成荧光物质(喹唔啉),用荧光分光光度计测定其荧光强度,其荧光强度与维生素C的浓度成正比。
脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物不与邻苯二胺反应,以此排除试样中荧光杂质产生的干扰。
· 实验条件
仪器及附件:
天津港东 F-380 型荧光分光光度计
荧光石英比色皿
分析条件:
激发波长:350nm
发射波长:430nm
药品:
淀粉酶、偏磷酸、乙酸、活性炭、盐酸、亚铁氰化钾、结晶乙酸钠、硼酸、邻苯二胺、维生素C标准品。
其它:
分析天平(0.0001g)、烤箱、水浴锅、80~200目筛子、研钵、抽滤装置、称量纸、药勺、量筒、容量瓶、具塞三角瓶、漏斗、滤纸、移液管、具塞比色管、烧杯、擦镜
纸、玻璃棒、胶头滴管等。
· 实验流程
样品前处理:
样品前处理步骤如下图所示:
图1 样品前处理流程图
备注:样品称样量依据其本身维生素C含量(约2mg)而定。淀粉酶活力为1.5U/mg,根据活力单位大小调节用量。
样品待测液制备:
样品经前处理后还需进行进一步的处理才可以上机进行检测。
样品待测液制备步骤如下图所示:
图2 样品空白溶液待测液和样品溶液待测液配制流程图
备注:样品称样量依据其本身维生素C含量(约2mg)而定。淀粉酶活力为1.5U/mg,根据活力单位大小调节用量。
标准样品待测液制备:
精密称取0.050g维生素C标准品,用偏磷酸-乙酸溶液A溶解并定容至50mL,再准确吸取10.0mL该溶液用偏磷酸-乙酸溶液A稀释并定容至100mL,配制成100μg/mL的标准溶液。
准确吸取经过处理的VC标准溶液(10μg/mL)0.5mL、1.0mL、1.5mL、2.0mL分别置于10mL试管中,补水至2.0mL,配制成VC标准样品工作液。再分别加入5mL邻苯二胺(OPDA)溶液,摇匀避光静置60min,即配制成VC标准样品待测液。
标准样品待测液制备步骤如下图所示:
图3 VC标准空白溶液待测液和VC标准系列溶液待测液配制流程图
· 测定结果
式中:
X——试样中维生素C的含量,单位为毫克每百克(mg/100g);
V——试样的定容体积,单位为毫升(mL);
c——由标准曲线查得的试样测定液中维生素C的质量浓度,单位为微克每毫升(μg/mL);
m——试样的质量,单位为克(g);
f——试样稀释倍数。
· 结论
采用荧光分光光度法测定食品中维生素C含量,操作简单,方法准确,是一种理想的方法。
由于维生素C本身易光解而且在测定过程中需要对每一种样品进行样品的背景扣除,因此,此实验对仪器的功能要求更高。港东F-380型荧光分光光度计率先在硬件上采用了激发侧挡光快门的设置,从而避免了样品被强光的直接照射;软件上采用了独特的双背景扣除功能,自动计算维生素C浓度,使整个实验操作简便,结果重现性良好。
为便于供应商及时了解政府采购信息,根据《财政部关于开展政府采购意向公开工作的通知》(财库〔2020〕10号)等有关规定,现将本单位2024年02月至2024年03月采购意向公开如下:序号采购项目名称采......
北京北分瑞利分析仪器(集团)有限责任公司联合青岛盛瀚色谱技术有限公司,于2024年1月29日共同发布国产高端气相色谱仪、离子色谱-原子荧光联用仪两款新品。中国分析测试协会理事长/中国科学院生态环境研究......
近日,铜仁市生态环境局企业信息就铜仁市生态环境监测站监测能力建设仪器设备采购项目进行公开招标,预算金额:1100万元,并于2024年02月20日09:30开标。一、项目基本情况项目编号:GZZT--2......
近日,国家药典委拟制定《中国药典》原子荧光光谱法标准,发布并公示“原子荧光光谱法标准草案”(以下简称《草案》)。原子荧光光谱法是基于蒸气相中待测元素的基态原子吸收光源辐射后,激发出具有荧光的特征谱线,......
摘要信息招标单位宁波市生态环境科学研究院招标编号NBMC-20239048招标估价2160000.00招标联系人席老师/0574-87169937 更多联系人招标代理机构宁波名诚招标代理有限......
按照自然资源行业标准制定程序要求和计划安排,自然资源部组织有关单位制定了《区域地球化学样品分析方法第35部分:金量测定泡沫塑料富集-火焰原子荧光光谱法》等13项行业标准。其中附件1-1为《区域地球化学......
近日,新绛县疾病预防控制中心实验室能力提升改造项目设备采购公告发布,本次预算金额1610.02万元,采购需求包括电感耦合等离子体质谱仪、高效液相色谱仪、气相色谱质谱联用仪、气相色谱仪、原子吸收分光光度......
生机勃勃、骄阳似火的六月里,迎来了2022年第二期ANTOP奖的正式起航。由北京金索坤技术开发有限公司申报的“原子荧光技术创新奖”ANTOP奖进入大众评审阶段。奖项名称:原子荧光技术创新奖奖项主体:S......
原子序数为81的铊(Thallium,Tl),在自然环境中含量很低,最近却频繁出现在环境标准和国家标准中,检出限要求均非常苛刻,前处理相当复杂,为不少检测人员带来了难题。近日,某企业推出测铊新方法,不......
2021年12月24日,第二十四届“全国光谱仪器学术研讨会”暨第三届“原子光谱应用与技术学术研讨会”举办的第二日,多位光谱大咖带来精彩报告。分析测试百科网作为本次会议的支持媒体,全程跟踪报道。中国海洋......