对抗肿瘤，试试活化的淋巴细胞

　　今年的诺贝尔生理医学奖颁给了PD1（免疫检查点）的发现者，让免疫治疗在治好卡特总统的黑色素瘤之后又被带火了，PD1/PD-L1耀眼的星光甚至让不明就里的公众将其治疗等同于免疫治疗，临床研究方向、甚至临床资源也有更向PD1/PD-L1聚集之势。有数据显示，我国2017年就已经有近60个PD-1/PD-L1临床试验公开登记。

　　事实上，免疫治疗的内涵广泛。11月26日，有媒体报道国内细胞治疗领域启动最大规模临床招募，该招募是为了服务于免疫细胞治疗用于防止肝癌根治术后复发的临床试验研究。用免疫细胞与肿瘤细胞“对阵”是科研领域在免疫治疗中另一个方向的临床探索。

　　“肿瘤免疫治疗是利用人体自身的免疫系统对抗肿瘤，清除肿瘤细胞，达到治疗肿瘤的目的，并保持持续的免疫记忆。”参与临床试验研究的中国医学科学院肿瘤医院教授吴健雄表示，肿瘤免疫治疗与传统的手术、放疗和化疗三种治疗方式不同，核心是激活机体自身的“防卫体系”，杀灭肿瘤细胞。

　　活化淋巴细胞 有集约化的“制导系统”

　　人类与肿瘤细胞的此次对战中，人类选择的“武器”是自身的淋巴细胞。采用的方法大致可描述为，从患者自体抽取外周血（20—100毫升），分离单个核细胞，在体外进行培养和活化，获得被广谱激活的淋巴细胞后，再“派回”到人体中，执行绞杀肿瘤细胞的任务。

　　“来源于患者自身的外周血细胞，在特定的体外细胞培养体系中，会进行选择性活化并生长。”北京永泰生物公司技术负责人王歈表示，在培养过程中，“战士”的筛选会同步进行——外周血细胞中的B细胞、巨噬细胞等会死亡，最终获得的回输成分主要为T淋巴细胞，有少数NK细胞。

　　这一“筛选战士”的方法被称为EAL（扩增活化的淋巴细胞Expanding Activated Lymphocytes）。据介绍，该方法的核心技术2011年获得国家发明ZL。“我们在获得ZL的基础上，进一步提高效率可在短时间内实现淋巴细胞的千倍增殖。”王歈说。

　　无论是免疫检查点抑制剂还是为T细胞装上“CAR”的“CAR-T”疗法，都是为了让被肿瘤细胞迷惑住的T细胞“重拾慧眼”，精确制导和打击肿瘤细胞。

　　可见“制导系统”是否优良，是肿瘤疗法有效性的关键要素之一。而活化淋巴细胞的“制导系统”是“原装”的，并非由人为安装或者只针对某一特定靶点，其作为武器的优势之一是它的“制导”目标并不唯一。王歈解释：“人体自身的T淋巴细胞由具有可以识别高达109种不同‘非己’成分抗原的不同T细胞组成，其中，包括具有识别肿瘤靶分子的T细胞。”

　　“在肿瘤患者中，这些细胞的功能往往被肿瘤细胞的免疫逃避机制所抑制，不能发挥抗肿瘤功能。”王歈解释，包括具有曾经接触过肿瘤靶标分子、被肿瘤靶标分子所激活的肿瘤特异性识别和杀伤的T细胞前体，这些细胞在每个人体内的数量和活性不同。通过EAL技术，这些靶向肿瘤细胞的T细胞可以在体外被广谱激活。

　　无血清培养 关注细胞制品的安全性“痛点”

　　将体内细胞抽提出来在体外走一遭，最大的风险就是可能被污染。而最危险的污染来自于有机培养物中可能存在的无法检出的病毒或其他生命有机物。

　　“牛血清被认为是为细胞培养提供养料的基础物质，但是它带入污染的风险也很大。”王歈说，团队首先解决了细胞体外的无血清培养问题，避免了可能由于外源性动物或人的因素导致的微生物感染。不仅如此，EAL技术还具有T细胞体外扩增效率高、活性好、稳定性好、可与化疗进行无缝配合的效果，于2017年获得药监总局签发的临床批件，是我国首个个体化免疫细胞不分期的大批件。

　　细胞治疗的另一个特点在于它是“活的药品”。有很多不确定性，标准化相对困难，在时间周期上也有更高的生产要求。

　　将细胞取出经体外活化，在实验室里数小时手工处理过程中，可能存在很多污染风险和不确定因素。有专家曾表示：现阶段人才缺乏的情况下，很有可能出现的情形就是，一个熟练的技术员可以把细胞制品的活性做到90%，而一个新手只能做到40%，这种差距导致细胞治疗无法进行产业化、规模化的运作。

　　标准化的生产工艺成为细胞治疗最终拿到临床批件进入临床的一个“痛点”。负责此次临床试验中细胞生产的永泰生物相关负责人表示：“经过10年的研究，永泰生物的EAL细胞生产工艺已经成为标准化生产工艺，可以做到规模化生产，生产周期可控。我们完全按照药品GMP生产规范进行生产管理。管理细节较一般生产大输液产品更为严格，质量要求的出厂合格率100%。”

　　最大规模临床招募 “死磕”发病率居高不下的肝癌

　　乙型肝炎病毒会诱发肝癌的发生。在我国由于庞大数量的乙肝病毒携带者，肝癌的新发病人数和死亡病人数均占到了全球肝癌新发病人数和死亡病人数的一半以上。据中国肿瘤登记中心（NCCR）2018年公布的统计数据，2015年中国新发癌症病例数429万，死亡人数281万。其中肝癌每年新发病人数为47万，位居第四；肝癌的死亡率位居第三，每年死亡人数高达42万。

　　“这是目前国内细胞治疗领域最大规模的一次临床招募，用于防止肝癌根治术后复发，招募人数总共为272人。”吴健雄介绍，该临床试验于2017年10月获批，所使用的EAL技术已经获得药物临床批件。试验的主要目的是评价EAL预防原发性肝癌根治性术后复发的疗效和安全性。

　　“我们要解答免疫治疗中一些目前仍未十分清楚的问题，例如非特异性培养的T细胞是否具有抗肿瘤作用、早期给予免疫细胞治疗是否会让患者获益等。”北京大学人民医院肝胆外科中心主任朱继业表示，此次临床试验由专业的临床试验服务企业来负责项目管理、监查、数据统计和CRC等具体工作，并有独立的数据监查委员会和第三方影像评估，并为后续科学研究给出客观详实的数据，可能为免疫细胞治疗技术应用于实体瘤提供更多的思路和依据。

　　随着人们对于肿瘤认知的加深，越来越多的科学家认可以肿瘤标志物作为肿瘤类别的划分依据，而并非以原发部位划分。“我们非常希望能够进行肝细胞癌的分子分型分析。目前，正在与基因测序公司进行讨论研究方案，希望通过对肝细胞癌的分子分型，鉴别出对免疫细胞治疗敏感和不敏感的肿瘤类型。”王歈说，希望在国内细胞治疗领域最大规模的临床试验研究中，找到对战“肿瘤”的广谱新利器，帮助更多类型的肿瘤患者。