色谱柱助力粮食中16种真菌毒素的测定

真菌毒素是真菌在适宜条件下产生的有毒次级代谢产物，能够引发人类、动物各种急、慢性疾病主要威胁人类健康的真菌毒素种类有单端孢霉烯族类毒素、伏马类毒素、赭曲霉类毒素等。目前，大部分的国家和地区都制定了粮食中真菌毒素限量标准，我国也高度重视真菌毒素污染问题，在2015年新修订的《食品安全法》中，首次将生物毒素明确列入重点关注的污染物质中。我国也已经制定了粮食中呕吐毒素（DON）、玉米赤霉烯酮（ZEN）、赭曲霉毒素（OTA）四种真菌毒素限量标准，新的毒素限量也在逐步制定完善中。据报道我国每年有3100万吨粮食在生产、储存、运输过程中被真菌污染，约占粮食年总产量的6.2%。为了保证我国粮食质量安全，避免不必要的经济损失，及时快速监测调查真菌毒素污染种类、水平及其风险尤为重要。

由于真菌毒素种类多样，且存在协同污染，为确保全面、快速的了解粮食中真菌毒素的污染情况，迫切需要一种简单、快速、灵敏、同时准确测定粮食中多种真菌毒素的方法。目前真菌毒素的检测方法主要有薄层色谱法、酶联免疫吸附法、高效液相色谱法、液相色谱串联质谱法。薄层色谱法程序复杂、可重复性和再现性差，基于抗原抗体相互作用的酶联免疫吸附法虽有较高的选择性，但无法准确定量，同时由于前处理简单，没有有效的净化，易受基质干扰，产生假阳性。

本文使用赛默飞高效液相色谱仪Dionex Ultimate 3000和三重四极杆质谱仪TSQ Endura MS/MS联用测定16 种真菌毒素的方法。该方法在16 min 内完成16 种常见真菌毒素的分离。

仪器条件

色谱条件

色谱柱：Thermo Scientific Hypersil Gold aQ 100 x 2.1 mm, 1.9 µm

流动相：

A: 5 mM NH4Ac + 0.5% acetic acid in water

B: 5 mM NH4Ac + 0.5% acetic acid in methanol

进样量：10μL/ 20μL

流速：400μL/min

质谱条件

Ion Source type: HESI

Detection Mode: t-SRM

Spray voltage positive: 3500 V

Spray voltage negative: 2500 V

Sheath gas: 45

Aux gas: 15

Sweep gas: 1

Ion transfer tube (T): 340 °C

Vaporizer (T): 350 °C

结论

本文采用液质连用法测定粮食中16种重要真菌毒素，涵盖目前国内外已设定限量的真菌毒素。使用Hypersil Gold aQ 100 x 2.1 mm, 1.9 µm色谱柱进行分析，16min内对16种真菌毒素完成分离，峰型对称，分析速度快，灵敏度高，重现性好。