液相色谱柱常见问题及解决方案

1.液相色谱柱柱压高    

 压力单位换算：1bar＝0.987大气压＝14.503psi＝0.1MPa＝1.0197kg/cm2

 （1）新柱（未进过样品或只进过柱效测试标样）压力高：

 以原厂报告上完全一样的条件下测试比较，若压力在报告压力值上下浮动200-300psi以内，可视为正常范围；若高于出厂报告压力值1倍或以上，有以下原因引起：

 1.～99.9％原因：系统压力高，包括保护柱，泵，管路和接头等引起。

 解决方案：从系统上拿掉柱子，逐步检查具体哪个部件引起的；或者换不同的仪器平衡柱子，比较压力值，排除柱子本身的问题。注意：必须是平衡柱子达足够时间后的稳定压力值。如果您仍然不放心，可先寄回在我们公司实验室测试。

 2.～0.1％原因：柱子本身压力高，寄回供应方测试，如若核实，可提供相关更换等处理。

 （2）使用一段时间后的旧柱压力升高：

HPLC系统原因仍然存在，排除系统原因后，几乎100％的原因是由于实验过程中杂质在柱中的累积。

 解决方案：尽量完善操作条件，做完样品后要及时冲洗干净，如缓冲盐的流动相一定要用高比例的水溶液（如90％）冲洗完全后再用有机相保存。

2.液相色谱柱柱效低    

 （1）新柱（未进过样品或只进过柱效测试标样）柱效低：

 以原厂报告的条件下测试同样的标样，Supelco，Kromasil以及Agilent等柱子以甲苯作为比较，CNW柱子以萘作为比较，Waters柱子以苊作为比较，根据仪器不同，如果250*4.6mm，5um柱效在2000左右的差异可以认为是符合出厂要求的；如果您的仪器测试结果相差太大，有以下原因：

 1.～99.9％原因：系统问题，包括接了保护柱，平衡时间不够等引起。

 解决方案：取下保护柱（测试柱效时不能加保护柱），增加平衡时间，对于新柱，50mm长的柱子平衡时间在30min以上，150mm的柱子在45min以上，250mm长的柱子在75min以上。如果您不放心，可先寄回在我们公司实验室测试。

 2.～0.1％原因：柱子本身柱效低，寄回公司检测，如果核实，可提供相关更换处理，

 （2）使用一段时间后的旧柱柱效降低：

 排除系统原因，基本是测试的条件和样品导致，如测试条件的pH值在柱子耐受pH值范围以外，导致柱子内填料的溶解或键和相流失，此外，样品前处理不好也会使柱子很快损坏。

 3.液相色谱柱峰前延、拖尾等峰形不好    

 （1）柱效测试标样峰形差：基本原因都是平衡时间不够引起，建议您平衡时间需达到*部分我们推荐的时间。此外，还有系统原因，可建议您换一台再测试或寄回测试。

 （2）样品峰形差：如果柱效测试峰形很好，但是测试样品峰形差，排除平衡时间等问题后，基本是由于样品性质所引起，如一些碱性样品会有拖尾现象，但是降低流动相pH值会有改善。

4. 液相色谱柱寿命短    

 根据不同系列的柱子或不同的测试条件，寿命长短各有不同。建议您选择性能稳定、质量有保证的品牌。