反相液相色谱柱样品前处理
由于被分析样品种类繁多,加之样品基质复杂,色谱柱极易被污染,是导致柱压升高、分离能力下降的原因之一,通常有下面两种情况。
1、直径大于筛板孔径的颗粒物,堵在柱头筛板上,极易导致柱压高;上样前用针式滤器过滤将很好的解决这个问题,一般有0.22和0.45um规格,根据您的需要选择合适规格的。同时在柱前接上在线过滤器,可过滤流动相携带的颗粒,泵、进样阀磨损流失的颗粒物。
2、吸附性强的小分子很难洗脱下来,多次上样后聚集在柱头,可导致柱效差,柱压高,尤其是食品、生物、环境样品更容易损伤色谱柱,建议用SPE固相萃取去杂,并安装保护柱。
反相液相色谱柱养成测柱效的习惯,正确评价色谱柱
每个厂家的色谱柱出厂报告中都会附有一份柱效报告谱图,代表该色谱柱的性能,我们只要留意理论塔板数和拖尾因子即可。当拿到色谱柱后,建议先测柱效(可参照出厂柱效报告上的方法),保留谱图,再做样品。
当使用了一段时间后,或者实验出现问题时,换一台正常的液相仪测柱效,对比上述保留的新柱柱效报告来评价该色谱柱,这样做可以排除液相仪、样品等其它因素,正确的判断色谱柱是否合格。
在修复损坏的色谱柱时,柱效测试将是您判断是否修复好的zui佳指标,并且柱效测试流动相很简单,能快速验证。
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