昆明小鼠原位胃癌移植模型的建立可以:(1)建立一个能真实模拟临床胃癌的理想动物模型;(2)深人研究胃癌的转移机制和寻找新的治疗方法;(3)为人胃癌转移机理与抗转移治疗提供一个有价值的工具。
皮下移植块原位移植法
实验方法原理 | 采用两种不同的肿瘤细胞株分别在昆明小鼠胃部原位建立胃癌模型。造模后对原位移植瘤的生长速度进行观察,并对胃癌组织中v EG F 的表达及M v D 进行检测,结果显示模型的成瘤率均为100%。昆明鼠胃部原位移植瘤的生长速度快,缩短了胃癌模型建立周期, 为筛选抗胃癌药物提供了有效简单的模型。 |
---|---|
实验材料 | |
试剂、试剂盒 | 1640 培养基VEGF抗体抗兔Envision抗体兔抗鼠CD31 抗体H2O2PBS抗VEGF抗体苏木素DAB显色液二甲苯石蜡甲醛青霉素链霉素戊巴比妥钠 |
仪器、耗材 | |
实验步骤 | 一、昆明小鼠皮下移植瘤传代 二、 原位移植模型的建立
定时观察所有裸鼠全身状况、运动情况、腹部体征、移植后脱颈处死解剖,取原位瘤。所取标本经10%甲醛固定、石蜡包埋、切片、HE染色,做组织病理学检查。 四、免疫组化染色 1. 采用EnVision免疫组织化学技术检测VEGF蛋白表达。EnVision是一种两步法免疫组化新技术,具有简便、特 异和敏感等特点。
五、 移植瘤微血管密度的测定 1. 采用EnVision 法,方法同4 ,一抗为兔抗鼠CD31 抗体,稀释倍数为1:10 0 。
六、 统计学处理 移植瘤MVD资料用无士SD 表示,采用t 检验。
|
注意事项 | 光镜下胃移植瘤细胞多呈椭圆形、核大、深染、病理性分裂相多见。瘤细胞排列呈巢状或索状,无明显腺体结构存在,在胃壁中浸润性生长。 |
其他 | 人 胃癌裸 鼠移植模型 经历 了细 胞悬 液皮下接种 、细胞悬液胃壁处接种及完整组织块 胃壁内移植 3个代表性阶段。肿瘤细胞悬液注射裸鼠胃壁形成的原位移植模型最易发生类似人类肿瘤的转移过程。 |