流式细胞术在组织化学与免疫组织化学中的应用

流式细胞术(flow cytometry，FCM)是对单个细胞进行快速定量分析与分选的一门技术。该技术是一项集激光技术、光电测量技术、计算机技术、流体力学、免疫荧光细胞化学技术及单克隆抗体技术为一体的新型高科技细胞分析技术。概括地说，流式细胞技术是通过流式细胞仪(flowcytometer)对处在快速直线流动状态中的细胞或生物颗粒进行多参数、快速和准确地定量分析和分选。
 
    流式细胞术在生物医学领域中应用十分广泛。凡能被荧光分子标记的细胞或微粒均能用于流式细胞仪检测。如在细胞周期研究中，根据DNA荧光染料(如PI)与细胞DNA双链的结合有一定量效关系，即DNA含量的多少与PI结合量成正比，因此，通过荧光强度可以反映细胞内DNA含量；在免疫学中，运用流式细胞术与单克隆抗体结合，在免疫分型、细胞分选、肿瘤细胞免疫监视、机体免疫状态监测、免疫细胞的系统发生及特性研究等方面均起着极为重要的作用；在肿瘤学中，利用流式细胞术除了进行细胞周期和DNA倍体分析外，还可定量分析检测细胞增殖标志物、细胞表面标志、癌基因蛋白产物、耐药蛋白及细胞凋亡等，均可获得组织形态学方法难以得到的信息，为肿瘤的临床诊断、治疗和预防提供帮助；在血液学研究中，应用流式细胞术除了用于白血病及淋巴瘤的免疫分型之外，还能进行血小板记数、血小板自身抗体测定、血小板膜表面糖蛋白分析及血小板活化分析等。
 
    将流式细胞术与生物芯片技术有机结合，把不同生物探针(核酸和蛋白等)标记在各种有荧光的微球上，以荧光标记微球作为反应载体在液相系统中完成生物学反应，即为流式细胞术液相芯片技术。它组成由荧光微球体—探针—目的分子—报告分子的反应模式，可以在同一液相中同时检测多个目的分子。在组织化学和免疫组织化学中，流式细胞术可以对不同表型的细胞进行分类计数，以达到对某种细胞定量检测的目的。这一功能是利用流式细胞术能同时检测细胞的多种荧光信号，对不同荧光信号的细胞进行分类计数，获得含有不同化学物质的细胞群体信息的特点。