减数分裂实验原理和步骤

 一、目的

    学习生殖细胞的取材和染色体制片，认识减数分裂各时期的形态特征。

二、原理 生物秀细胞实验论坛交流

    减数分裂是形成生殖细胞的一种特殊方式的细胞分裂。它是遗传学中一个特别重要的事件，是维持大多数动植物品种染色体数目世代稳定传递的根本机制。同时，基因的分离、自由组合以及交换无不是通过减数分裂发生的。可以说减数分裂是经典遗传学的根本，动植物都是通过减数分裂形成配子，所以减数分裂通常以植物的花粉母细胞或动物的精巢、卵巢作材料进行观察。减数分裂的特点是：连续进行两次核分裂，而染色体仅复制一次，从而形成四个只含单倍数染色体的产物——生殖细胞（或配子）。

三、材料

1．  小麦雄花序。

2．  蝗虫精巢。

四、器具和试剂

    镊子、解剖刀、解剖针、载玻片、盖玻片、酒精灯、吸水纸、滴瓶、皮头铅笔、火柴、显徽镜。

    卡诺氏固定液，改良苯酚品红、70％酒精。

五、步骤 生物秀细胞实验论坛交流

（一）小麦花粉母细胞涂片观察

1．  取材和固定：当小麦植株开始挑旗，旗叶与下一叶片的叶耳间距约3～5cm，花药长度约2.0～2.5mm，气温在23℃～25℃时，将穗子剥出，在卡诺氏固定液中固定24小时。如暂不制片可转入70％酒精中，4℃保存。

2．  大鼠细胞染色和压片：从穗中部小穗中取出花药若干置于载片上，切去花药端部，滴两滴改良苯酚品红，用摄子挤压花药，使内含物全部挤出，除去药壁，将挤出的细胞轻轻敲打；如果花药较小，也可滴两滴染液后用镊子直接将花药捣碎，去除未碎的组织，然后盖上盖玻片，在酒精灯上微微加热。用左手拇指及食指固定盖片与载片，勿使其移动。右手拇指用力压盖玻片，使细胞伸展开。

3．  镜检：由于小麦小穗发育是以中部小穗最先发育，然后依次向上、下推移，所以在一个穗子上往往能找到减数分裂的若干时期。如果中部花药尚未进入减数分裂时期则需要另选一个更大的稳于取花药制片。

（二）蝗虫精巢精母细胞制片观察

1．  取材和固定：捕捉进入繁殖期的雄性蝗虫，剪开胸腹部体壁，放入卡诺氏固定液中固定24小时，暂不制片时，可重复固定一次，转入70％酒精中4℃保存。

2．  制片：取虫体剪去翅膀，在翅的基部后方，相当于腹部前端的背侧，仔细剪干体壁，从精巢中前部取几段精细管放在载片上，用解剖针撕碎精细管，除去大块管壁组织，涂匀。

3．  染色观察：加改良苯酚品红3～5滴，染色10分钟（必要时可在酒精灯上快速掠几下）加上盖片和吸水纸，以指压法压片。

    光镜下，可以看到减数分裂的各个时期，以及精子的形成过程。