三聚氰胺(Melamine)是一种重要的三嗪类含氮杂环有机化工原料,主要用于生产三聚氰胺-甲醛树脂,广泛用于木材加工、塑料、涂料、造 纸、纺织、皮革等行业,为白色晶体。三鹿奶粉事件引发了对三聚氰胺检测的广泛关注,国家质量监督检验检疫总局和国家标准化管理委员会相继发布了《原料乳与 乳制品中三聚氰胺检测方法》(GB/T22388-2008)和《原料乳中三聚氰胺快速检测 液相色谱法》(GB/T22400-2008)的国家标准。本文参考了以上标准并进行配制条件优化,建立了液相色谱检测法,前处理简单,检测限、精密度、 重现性以及回收率均符合国家标准。
1 实验部分
1.1 仪器与试剂
高效液相色谱仪(含UV1620紫外-可见检测器1台,P1620高压恒流泵1台;AT-330色谱柱温箱;FA2004分析天平;TGL-16G-A离心机;三聚氰胺标准品>99%;辛烷磺酸钠(色谱纯);磷酸(分析纯)、乙腈(色谱纯)、纯净水。
1.2 标准品溶液配制
精密称取三聚氰胺标准品,溶于50%的甲醇水溶液,配制称1.422mg/ml的标准储备液,于4℃避光保存。根据实验需要,用流动相逐级稀释成适当浓度的标准工作液。
1.3 样品前处理
称取2g酸奶样品与50ml具塞离心管中,加入乙腈:水=50:50混合溶液15ml,充分混匀后超声提取15min。取提取液250ul,加 入0.1mol/l盐酸750ul,混匀,以12000r/min离心5min,取上清液,0.22um滤膜过滤,作为HPLC测定溶液。
1.4 色谱条件:
色谱柱:Globalsil C18 5μm(ID4.6mm×250mm)
流动相:乙腈/缓冲盐=15/85(缓冲盐:10mM辛烷磺酸钠水溶液,含0.1%磷酸)
流速:1.0ml/min
波长:240nm
温度:40℃
2 实验结果
2.1 精密度实验
取浓度为0.569μg/ml三聚氰胺标准工作液,按上述色谱条件,连续进样5次,以各成分峰面积计算RSD(%),所得结果如表1所示:保留时间相对标准偏差(RSD)为0.23%,峰面积RSD为0.57%。
表1 精密度实验
NO. | Retention time(min) | Peak High | Peak Area |
1 | 11.933 | 289 | 4216.8 |
2 | 11.990 | 290 | 4264.2 |
3 | 11.928 | 287 | 4246.0 |
4 | 11.927 | 287 | 4242.8 |
5 | 11.923 | 284 | 4218.6 |
RSD(%) | 0.23 | 0.82 | 0.57 |
图1 三聚氰胺标准品
2.2 标准曲线
配置浓度分别为0.142、0.284、0.853、1.422、7.110、14.220μg/mL的三聚氰胺标准工作液。将以上6种标准工 作液在上述色谱条件下按浓度由低至高进样。用最小二乘法以对照品浓度(横坐标X轴,µg/ ml)对峰面积(纵坐标Y轴)进行线性回归,求算标准曲线。
2.3 加样回收率和重现性实验
取已知三聚氰胺含量的酸奶样品,加入一定量的标准储备液,按“样品前处理” 操作,平行制备3份,得到样品溶液后按上述色谱条件进样分析,得到加样回收率及重现性结果,见表2。
表2 加样回收率和重现性(n=3)
Spiked(mg/kg) | Recovery(%) | RSD(%) |
35.0 | 87.2 | 1.37 |
图2 空白酸奶样品
图3 加标酸奶样品
2.4 检测限及定量限
依据噪声值,按3倍信噪比,计算其理论检出限,为0.221 mg/kg;按10倍信噪比,计算其定量限,为0.738 mg/kg。
3 结论
本方法优化了高效液相色谱法检测乳制品中三聚氰胺测定方法,该方法简化了前处理步骤,易于操作,线性关系良好,有较好的精密度和重现性,回收率满足国家标准的要求,检出限和定量限也符合目前三聚氰胺的检测要求。
上海市徐汇区疾病预防控制中心2024年04月政府采购意向为便于供应商及时了解政府采购信息,根据《财政部关于开展政府采购意向公开工作的通知》(财库〔2020〕10号)等有关规定,现将上海市徐汇区疾病预防......
北京大学2024年5月政府采购意向-超高灵敏度液相色谱串联三重四极杆质谱仪详细情况超高灵敏度液相色谱串联三重四极杆质谱仪项目所在采购意向:北京大学2024年5月政府采购意向采购单位:北京大学采购项目名......
项目概况全二维超高效液相色谱-四级杆串联飞行时间质谱联用仪采购项目的潜在投标人应在陕西省政府采购综合管理平台项目电子化交易系统(以下简称“项目电子化交易系统”)获取招标文件,并于2024年04月30日......
一、合同编号:豫财招标采购-2024-126-A二、合同名称:河南省第三人民医院(河南省职业病医院)高分辨液相色谱-质谱联用仪采购项目三、项目编号:豫财招标采购-2024-126四、项目名称:河南省第......
广安市疾病预防控制中心(简称“广安市疾控中心”)是一家位于中国四川省广安市的市级疾病预防控制机构,其主要职责是为维护人民群众的身体健康提供专业的防疫保障服务。本次采购仪器为超高效液相色谱高分辨质谱仪联......
一、合同编号:11N4985062432024801二、合同名称:超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱仪采购项目合同三、项目编号:GXZC2024-G1-000025-JDZB四、项目名称:超高效液相色......
一、项目基本情况项目编号:WH-530300-2024-0056项目名称:自动在线固相萃取液相色谱质谱联用仪及附属设备和分析耗材采购项目预算金额(万元):338.956最高限价(万元):338.956......
一、项目基本情况项目编号:GXZC2024-G1-000065-JGJD项目名称:广西蚕桑生态学与智能化技术应用重点实验室设备采购预算金额:387.000000万元(人民币)最高限价(如有):387.......
项目编号:CNRC-24HQ-AE103项目名称:广东粤港澳大湾区黄埔材料研究院超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱仪采购项目预算金额:370.000000万元(人民币)最高限价(如有):370.000......
导读:4月1日,国家标准GB/T43240-2023《毛发中55种滥用药物及代谢物检验液相色谱-质谱法》将要实施。2024年4月1日,国家标准《毛发中55种滥用药物及代谢物检验液相色谱-质谱法》将要实......