发布时间:2019-09-07 20:48 原文链接: 临床免疫检验中的15大干扰因素,不知道怎么能行?

干扰物是临床实验室检测误差的一个很重要的来源,它们在某种程度上对病人来说表现为是一种危害。常规工作中精密度通过室内质控监控,准确性通过与参考物质作比较试验进行验证,但实验室不能很容易的检测干扰物质引起地误差。

广义上干扰物是导致分析物浓度或催化活力出现偏移的物质,如免疫法干扰常由交叉反应所致,因此,干扰物通过干扰作用来影响分析特异性,从干扰物来源,干扰作用分为内源性和外源性干扰。

一、内源性干扰物质

1、类风湿因子(Rheumatoidfactors,RF)

类风湿因子(rheumatoid factor,RF)是一种抗人或动物IgG分子Fc片段抗原决定簇的抗体,是以变性IgG为靶抗原的自身抗体。RF最初由Rose等(1984年)在类风湿性关节炎(RA)患者血清中发现。RA患者体内有产生RF的B细胞克隆,在变性IgG或EB病毒的直接作用下可大量合成RF。RF主要为IgM类自身抗体,但也有IgG类、IgA类、IgD类和IgE类。

人血清中IgM、IgG型类风湿因子(RF)可以与ELISA系统中的捕获抗体及酶标记二抗的Fc段直接结合,从而导致假阳性。

类风湿因子干扰的排除

(1)用F(ab)替代完整的IgG。

(2)标本用联有热变性(63°C,10min)IgG的固相吸附剂处理(将热变性IgG加入到标本稀释液中同样有效)。

(3)检测抗原时,可以用2-巯基乙醇等加入到标本稀释液中,使RF降解。

2、嗜异性抗体

嗜异性抗体(Id)是由低纯度抗原引起的,又称之为对非特异性抗原产生的抗体应答。

天然的嗜异性抗体(IgG)可分为两类:

一类(85%的假阳性或假增高由其引起)可结合于山羊、小鼠、大鼠、马和牛IgG的Fab区域,但不与兔IgG的Fab区结合。

另一类(15%的假阳性或假增高由其引起)可结合于小鼠、马、牛和兔IgG的FC区表位,但不与山羊和大鼠IgG的FC区表位结合。嗜异性抗体可通过交联固相和酶标的单抗或多抗而出现假阳性或假增高反应。

其也可造成假阴性或假降低的结果。

嗜异性抗体干扰的排除

使用特异的兔F(ab’)2片段作为固相或酶标抗体。

在标本或标本稀释液中加入过量的动物Ig,封闭可能存在的嗜异性抗体。但加入量不足或亚类不同时无效。

使用靶特异的非Ig亲和蛋白(Affibody)替代固相或酶标抗体之一。采用噬菌体展示技术展示来自单个金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)联合文库的人IgA结合亲和蛋白,用于IgA的测定,不受异嗜性抗体的影响。

使用特异的鸡抗体作为固相和测定抗体。

3、人抗动物(如小鼠、免、羊等)抗体

人抗小鼠抗体(human anti-mouse antibodies,HAMA):抗鼠抗体对使用鼠源性单克隆抗体的免疫测定,可产生假阳性(定量检测假增高)或假阴性(定量假降低)结果。

干扰排除的方法

使用特异的抗体F(ab’)2片段作为固相或测定酶标抗体。

在标本或标本稀释液中加入过量的鼠Ig,封闭可能存在的抗鼠抗体。

使用特异的鸡抗体IgG作为固相和测定抗体。鸡IgG不与人抗鼠抗体