实验方法原理 | λ 噬菌体两臂内部末端 5'-磷酸基团的去除,能有效防止自连和减少非重组噬菌体的背景。当使用含单一克隆位点的插入型载体(如 λgt10、λgt11 和 λORF8)或使用虽含多克隆位点但用单一酶切割的插入型载体(如 λgt18-23 和 λZAP) 时,本方法可被用于抑制非重组子背景。 |
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实验材料 | 噬菌体 T4 DNA 连接酶 牛小肠碱性磷酸酶 去磷酸缓冲液 蛋白酶 K 限制性内切核酸酶 λ 噬菌体 DNA λ 噬菌体包装混合物 |
试剂、试剂盒 | λ 复性缓冲液 氯仿 EDTA 乙醇 酚:氯仿 SDS 乙酸钠 TE Tris-Cl |
仪器、耗材 | 狗脚指甲钳 水浴 |
实验步骤 |
一、材料 展开 |
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