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基本方案
实验方法原理 |
D-果糖-1,6-二磷酸 ⇌ 二羟基丙磷酸盐+3-磷酸-D-甘油醛 D-甘油醛-3-磷酸以酰肼的形式,腙在 240 nm 处有吸收光。 |
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实验材料 | 醛缩酶 |
试剂、试剂盒 | 肼硫酸盐 FDP-Na3H |
仪器、耗材 | 分光光度计 |
实验步骤 |
实验所需「试剂」具体见「其他」 0.9 ml 测定混合物 0.1 ml 醛缩酶溶液 每隔 10 min 记录 240 nm、25℃ 处的吸光值,空白对照用水取代果糖-1,6-二磷酸
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注意事项 | |
其他 |
试剂: 3.5 mmol/L 肼硫酸盐溶于 1 mmol/L EDTA 中,pH 7.5[溶解 445 mg(Mr=130.1)和 372 mg EDTA·Na2·2H2O(Mr=130.1)和 372 mg EDTA·Na2·2H2O(Mr=372.2)在 1 L H2O 中,并用 1 mol/L NaOH 调节到 pH 7.5] 12 mmol/L果糖-1,6-二磷酸(FDP-Na3H,Mr=406.1;487 mg 溶于 100 ml H2O,调节至 pH 7.5) 溶解醛缩酶,大约 1 U/ml(使用前准备)
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