方案20.2 复苏冻存细胞实验
实验方法原理 |
快速复苏细胞,缓慢稀释,以高细胞密度重新接种(图20.9)。
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实验步骤 |
材料 展开 |
注意事项 |
1. 将冻存管从液氮中取出时,必须穿实验衣,戴手套。若冻存管浸没在液氮中,则必须待面罩或护目镜,也必须穿实验衣戴手套。储存在液氮中的冻存管,包括塑料小管都可能吸入液氮,复苏时将可能发生剧烈爆炸。该种情况下,必须使用带盖的塑料水桶进行复苏,以控制爆炸。 2. 塑料冻存管在使用前要仔细检查,以防管壁破裂或螺口不配套造成密封 不严。 3. 用DMSO作为冻存保护剂时,用前应先将冻存液在4℃预冷,解冻后应马 上洗去保护剂。
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其他 |
1. 检查细胞活率。用1ml培养液重悬细胞,台盼蓝染料排除法检查细胞存活率。 2. DMSO有剧毒,使用时要特别注意。此外,在冻存前越晚加入细胞越好,解冻后要尽快除去,以避免对细胞的毒害。
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