血清学试验指在体外用已知抗体(或抗原 )检测抗原(或抗体),是临床细菌性疾病诊断和病原菌鉴定的重要手段之一。血清学试验可分为血清学鉴定和血清学诊断两部分。用已知抗体(即含特异抗体的免疫血清或单克隆抗体等)检测标本中或分离培养物中未知细菌的种、型或细菌抗原,称为血清学鉴定;而用已知细菌或特异性抗原检测患者血清中有无相应抗体及其效价的动态变化,作为某些感染性疾病的辅助诊断,称为血清学诊断。
一、血清学鉴定
(一)玻片凝集试验
用于鉴定细菌 的诊断血清有以下几类:
l、多价诊断血清:即混合诊断血清,血清中含有两种以上细菌的相应抗体。一般用于细菌定属或群。
2、单价诊断血清:仅含一种(或型)细菌的相应抗体。可用于细菌的定种(或型)。
3、因子诊断血清:仅含一种细菌的型特异性抗体的诊断血清称为因子血清。可用于细菌分型。
(二)协同凝集试验
见免疫学 实验一(P.9)。此方法已用于链球菌、脑膜炎奈瑟菌、沙门菌、志贺菌等的鉴定或分群、分型等。亦可用于测定临床标本中的细菌抗原或可溶性代谢产物如细菌外毒素。
二、血清学诊断
(一)肥达试验(Widal Test)
用已知伤寒沙门菌菌体(O)抗原和鞭毛(H)抗原,甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌(乙型副伤寒沙门菌)和希氏沙门菌(丙型副伤寒沙门菌)的H抗原与病人血清作试管凝集试验,测定病人血清中相应抗体及其效价,以辅助诊断伤寒和副伤寒。
【材料】待检血清、伤寒沙门菌“H”、“O”菌液、甲、乙型副伤寒沙门菌“H”菌液、小试管、吸管、生理盐水、水浴箱等。
【方法】
1、按下图所示取28支试管排成4排,每排 7支,并分别标明号码。
“H” → ① ② ③ ④ ⑤ ⑥ ⑦
“O” → ① ② ③ ④ ⑤ ⑥ ⑦
“A” → ① ② ③ ④ ⑤ ⑥ ⑦
“B” → ① ② ③ ④ ⑤ ⑥ ⑦
2、另取试管一支,先将病人血清做1:10稀释(0.9ml生理盐水+0.1ml病人血清,混匀后即成)。
3、每桌四人,各做一排。
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