绿藻门、轮藻门、红藻门、褐藻门鉴定

实验方法原理:

实验材料:绿藻

试剂、试剂盒：

I-Kl 溶液                                                                  

浓 KOH 溶液                                                                  

0.1%亚甲基蓝溶液                                                                  

2%-3%盐酸（或乙酸）溶液

仪器、耗材：

显微镜                                                                 

镊子                                                                 

解剖针                                                                 

载玻片盖玻片滴管培养皿                                                                 

吸水纸

实验步骤：

绿藻门 Chlorophyta( 图 2-19-1)

绿藻门是藻类植物中种类最多的一大类群，分布极广，以淡水最多。其所含色素、细胞壁成分、贮藏营养（淀粉）、顶生鞭毛和高等植物相同，藻体为鲜绿色，被认为是高等植物的祖先。绿藻门植物的形态、结构和生殖方式各式各样。

1 衣藻属 Chlamydomonas( 图 2-19-lA)

隶属于团藻目，衣藻科。是能运动的单细胞藻类的代表。本属分布广泛，多生于有机质丰富的水沟、湿土表面或临时积水中，使水呈草绿色。用吸管吸取一滴培养液制成临时水封片（或衣藻永久玻片），先在低倍镜下观察，然后选择个体较大的用高倍镜观察。可见衣藻为球形、卵形、椭圆形或宽纺锤形的单细胞绿澡，细胞壁薄，具两条顶生等长的鞭毛。如运动过快，可在盖玻片一侧用吸水纸吸去多余水分或加入胶水使其运动减慢。

(1) 细胞结构：

①细胞壁：位于细胞的最外层。

②载色体：一个，多为杯状，占原生质体的绝大部分空间。

③眼点：红色，位于细胞前端侧面。

④伸缩泡：位于细胞前端的细胞质中，显微镜下为两个发亮的小泡

⑤蛋白核：多为一个，大型，埋藏在载色体基部。用 I-KI 染色后，蛋白核变成蓝紫色。

⑥鞋毛：将视野调暗，可看见不动或微动的鞭毛。由于吸碘鞭毛膨胀加粗，因而更为明显。⑦细胞核：由于较小，且被载色体遮挡，所以－般不易看清。

(2) 无性生殖和有性生殖

取培养缸底部的绿色沉积物制片，在显微镜下观察，可见有的衣藻失去鞭毛不能游动，细胞里有 2 、4 、 8 、 16个游动孢子，这是衣藻在进行无性生殖，此时的衣藻已转变成游动抱子襄。有性生殖不常见，如果观察到具 4条鞭毛和 2个蛋白核的衣藻，说明衣藻在进行有性生殖，有时在视野中可看见橘红色、壁厚并具有刺状突起的小球形体，这是衣藻的成熟合子。

2 小球藻属 Chlorella（图 2-19-IB),

多生活在有机质丰富的水中，是一种不具鞭毛，不能运动的单细胞藻类。用吸管吸一小滴小球藻水液制成临时装片（或永久玻片），在显微镜下观察，藻体很微小，杆高倍镜下也只能看见球形或椭圆形的形状。一个叶绿体，片状弯生，但往往只能从细胞内发亮的凹处来辨别。

3 团藻属 Volvox( 图 2-I9-IC)

隶属于团藻目，团藻科。该属是团藻目中最进化的类型。藻体是由数百至上万个衣藻型细胞组成的多细胞空心球体，各细胞间以胞间连丝相连。植物体有前后端分化，其后端有些细胞分化为较大的生殖胞。团藻多在春夏季生长于淡水池塘或临时积水坑中。用吸管吸取团藻水样制成临时水装片（或用永久装片），在显微镜下观察它们的形态结构、运动方式、细胞数目，并注意观察体内是否有第一代甚至第二代子群体，理解其无性生殖和有性生殖过程。

4 水绵属 Spirogyra(图 2-19-2)

隶属于双星藻目，双星藻科。植物体由长圆柱形细胞形成不分枝的丝状体，具 1 至多条带状载色体和接合生殖方式，是最常见的丝状绿藻，广布于池塘、沟渠、稻田中，常成团生于水底或漂浮于水面。碧绿色手触有滑腻感（细胞壁外层有较多果胶质），－年四季均可采到。

用镊子取几条水绵制成临时水装片（注意用解剖针拔散开），在显微镜下观察以下特征：

(1) 藻体形态与细胞结构低倍镜下观察，可见水绵为单列细胞组成的才分枝的丝状体，最明显的特征是每个细胞中都有螺旋绕生的带状载色体。不同种类载色体条数不同，从1条到多条，每条载色体上有一列发亮的蛋白核。用 I-KI 溶液染色后置高倍镜下观察，可看到若褐色的细胞壁和着淡黄色的贴壁分布的细胞质。把光线调暗，调节细准焦旋钮，可看到分布丁细胞中央的黄色细胞核（注意与蛋白核区分）。仔细观察，还可看到中央原生质和周围细胞质由原生质丝穿越大液泡彼此相连。

(2)接合生殖

水绵多在春秋季节发生接合生殖，这时藻体由绿色变为黄绿色，且常成片漂浮在水面上。若将所采新鲜材料的瓶子正对阳光，用放大镜观察，丝状体上褐色的斑点即为合子，说明水绵正在进行接合生殖。用镊子取几条有接合生殖的水绵制成临时水装片（或水绵接合生殖永久玻片），置于显微镜下观察接合生殖的各个时期：

①两条丝状体并列，相对的细胞侧壁产生突起；

②两相对细胞的突起相接，横壁溶解形成接合管，各形成一个配子。同时，两相对细胞的原生质体浓缩，

③－条丝状体中的每个细胞（雄配子囊）内的配子以变形虫式的运动，通过接合管流入另一丝状体的细胞（雌配子囊）中，

④一条丝状体内的细胞内全部形成合子，另一条丝状体的细胞全部为空壁，特称梯状接合。有时还可看到单条藻丝相邻细胞的侧面接合情况。观察成熟的合子的形状、颜色和壁上的纹饰。

5 丝藻属 Ulothrix

隶属于丝藻目，丝藻科。多固着生长在清洁流水的石头或水中其他物体上，丛生呈深绿色绒毡状。采集时需用小刀从固若物上刮下，以保持固着器的完整。用摄子取少量藻体制成临时水装片，在显微镜下观察以下特征（图 2-19-3)：

（1）藻体形念和细胞结构：丝藻为单列细胞组成的不分枝的丝状体。

6. 其他绿藻门植物的观察

观察石莼属、盘藻属、空球藻属、栅藻属、刚毛藻属、水网藻属、双星藻属、新月藻属新鲜材料（或水久制片｝以及腊叶标本。