影响ELISA试剂盒中非特异性显色缘由剖析

影响ELISA试剂盒中非特异性显色的缘由许多，如试剂盒特异性、查验标本中含酶符号物的干扰物，操作进程中的疑问。这篇文章就这一缘由作一简明剖析,以便可以经过以上方法把非特异显色降至zui低极限，然后跋涉检测的特异性，并得到更准确、可靠的试验作用。查验标本中富含酶符号物的干扰物包被物的纯度。

在酶联免疫测定尤其是直接ELISA中，试剂的特异性取决于运用抗原的纯度。当时由于技术条件的绑缚，包被用抗原或的纯度不可以抵达100%，所以有些非特异性显色不可避免，只能尽可以跋涉纯度特异性。当时运用的包被抗原一般为组成多肽抗原。 包被的效价具有高亲和力和高特异性的包被抗体，是挑选试剂特异性的重要方面。

内源性干扰物：类风湿因子(RF)、黄疸等，类风湿因子是可作用于多种动物以及人IgGFc段的自身抗体，大都为IgM类，能充当抗原成分与固相及酶标抗体反应，然后呈现非特异性显色。 黄疸血标本中常富含内源性过氧化物酶，如用辣根过氧化物酶为符号物，就有可以发生非特异性显色。

外源性干扰物，常常因样品搜集、贮存、处置不当构成如样品溶血，被细菌污染，标本凝集不全等。溶血标本，红细胞溶解分裂，释放出血红素构成，而血红素中的铁卟啉是过氧化物酶的类似物，以HRP为符号的ELISA测定中，溶血标本可以会增加非特异性显色。如有细菌污染，菌体中可以富含内源性HRP，有国内报道酶免HAg试剂检测溶血标本时可构成假阳性。如在冰箱中保管过久，其间的IgG可发生聚合，在直接法ELISA试剂盒中可使本底加深。因而，血标本在搜集处置时应留神，在冰箱中保管不易过久。

ELISA试剂盒是ELISA中重要的一步，意图是关闭固相载体表面尚未被所占有的空位，减少后续进程中非特异性蛋白的干扰。