高效液相色谱仪是在经典液相柱色谱仪的基础上,引入了气相色谱仪的理论,采用了高压输液泵、高效固定相、梯度洗脱技术和高灵敏度检测器,具有高压、高速、高效、高灵敏度、高选择性和应用范围广等特点。高效液相色谱仪与气相色谱仪的比较如下:
一、应用范围:
1、气相色谱仪:
(1)能气化、热稳定性好和沸点较低的样品。
(2)高沸点、挥发性差、热稳定性差、离子型和高聚物样品不能检测。
(3)只有15%~20%的有机物能用气相色谱仪分析。
2、高效液相色谱仪:
(1)溶解后能制成溶液的样品。
(2)分子量大、难气化、热稳定性差、高分子和离子型样品及具有生理活性物质均可检测。
(3)应用广泛,占80%~85%的有机物。
二、流动相:
1、气相色谱仪:
(1)流动相为气体。
(2)流动相无毒,易处理。
(3)流动相与组分之间无亲和作用,只与固定相互作用,不参与分配平衡过程。
2、高效液相色谱仪:
(1)流动相为液体。
(2)大多数流动相有毒。
(3)易污染环境。
(4)成本较高。
(5)流动相与组分之间有亲和作用,提高了柱选择性,改善分离度,对分离起很大作用。
(6)流动相种类较多,选择余地大。
(7)流动相极性和PH值的选择对分离起重要作用。
(8)可选用不同比例的两种或两种以上液体作为流动相,增大分离选择性。
三、固定相:
1、气相色谱仪:种类多。
2、高效液相色谱仪:不如气相色谱仪固定相种类多。
四、色谱柱:
1、气相色谱仪:用毛细管柱可得到很高的柱效。
2、高效液相色谱仪:色谱柱不能很长,柱效不是很高。
五、选择性:
1、气相色谱仪:流动相不影响分配,一般靠改变固定相和色谱柱温来改变选择性。
2、高效液相色谱仪:主要靠改变流动相来改变选择性。
六、检测器:
1、气相色谱仪:有很灵敏的选择型检测器,也有较灵敏的通用型检测器。
2、高效液相色谱仪:有较灵敏的通用型检测器。
七、操作温度:
1、气相色谱仪:加温。
2、高效液相色谱仪:室温。
八、运行和操作难度:
1、气相色谱仪:容易。
2、高效液相色谱仪:比气相色谱仪难一些。
九、仪器制造难度:
1、气相色谱仪:难度较小。
2、高效液相色谱仪:难度较大。
十、样品回收:
1、气相色谱仪:破坏样品,回收困难。
2、高效液相色谱仪:不破坏样品,回收容易且可定量,适合大量制备。
十一、其它:
1、高效液相色谱仪能完成难度较高的分离。
气相色谱仪流动相载气是色谱惰性的,不参与分配平衡过程,组分与流动相之间无亲和作用,只与固定相互作用。高效液相色谱仪流动相与组分之间有亲和作用,提高了柱选择性,改善分离度,对分离起很大作用。可选用不同比例的两种或两种以上液体作为流动相,增大分离选择性。通常在室温下操作,有利于色谱分离条件的选择。
2、凡是能用气相色谱仪分析的样品一般不用高效液相色谱仪。
气相色谱仪更快,更灵敏,更方便,耗费低。
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