在经典色谱的基础上，高效液相色谱(HPLC)是以气相色谱法为基础的。技术上，将流动相转变为高压输送输送压力可达4.9Pa色谱柱用小粒径填料以特殊的方式填充，使柱效应比经典液相色谱（数万或数千米塔板）要高得多。同时，在色谱柱后面有一个高灵敏度的检测器，可以连续检测流出液。
特点
1.高压：液相色谱以液体为流动相（称为载液），液体在色谱柱中流动阻力大。为了快速通过色谱柱，必须对载液施加高压。一般可达150-350-105帕。
2.高速：柱内流动相的流速远快于经典色谱法，一般可达1-10ml/min。高效液相色谱所需的分析时间远小于经典液相色谱，通常小于1小时。
3.高效：近年来发展了许多新的固定相，大大提高了分离效率。
4.高灵敏度：高灵敏度检测器在高效液相色谱(HPLC)中得到了广泛的应用，进一步提高了分析的灵敏度。例如，荧光探测器的灵敏度可达10-11g。此外，样本大小很小，通常是几微升。
5.应用范围广：气相色谱法与高效液相色谱法的比较：气相色谱法虽然具有分离能力好、灵敏度高、分析速度快、操作方便等优点，由于工艺条件的限制，气相色谱法难以分析沸点高或热稳定性差的物质。高效液相色谱法(HPLC)只要求样品不需气化即可制成溶液，不受样品挥发性的限制。原则上，高效液相色谱法可用于高沸点、热稳定性差、相对分子质量高（大于400）的有机物的分离和分析（这些物质约占总有机物的75%-80%）。据统计，约20%的已知化合物可以用气相色谱法进行分析，约70%-80%的化合物可以用液相色谱法进行分析。
高效液相色谱（hplc）可分为高效凝胶色谱、疏水高效液相色谱、高效液相色谱、高效离子交换液相色谱、高效液相色谱和高效液相色谱不同类型的高效液相色谱分离或分析的原理基本上类似于相应的普通液相色谱的原理。不同之处在于高效液相色谱法灵敏、快速、分辨率高、重复性好，必须在色谱仪中进行。