发布时间:2020-02-05 16:58 原文链接: 高亲和力高纯度零污染的细胞培养级抗体制备指南

单克隆抗体(monoclonal antibody,MAb),是针对专一的抗原决定簇产生的抗体,单克隆技术又名杂交瘤技术起源于1975年,主要原理是利用产生抗体的B细胞与骨髓瘤细胞杂交融合成杂交瘤细胞,生产抗体。

目前大量制备单抗的方法主要有两种方法:

一种是动物体内生产法腹水制备,在小鼠腹腔内接种杂交瘤细胞,杂交瘤细胞在小鼠腹腔内增殖,并产生和分泌单克隆抗体,约1-2周,可见小鼠腹部膨大,用注射器抽取腹水,即可获得大量单克隆抗体;另一种是细胞体外培养法,将杂交瘤细胞置于培养瓶中进行培养,在培养过程中,杂交瘤细胞产生并分泌单克隆抗体,收集培养上清液,离心去除细胞及其碎片,即可获得所需要的单克隆抗体。


单克隆抗体的制备流程

腹水制备法操作简单、制备成本低,是目前国内生产抗体的主要方式,但是,得到的腹水常混有小鼠的各种杂蛋白(包括Ig),而且还有污染动物病毒的危险。而体外培养法通过转瓶培养制备的细胞培养级抗体,不但不含小鼠杂蛋白和动物病毒,而且抗体易纯化,目前在国外抗体生产中非常流行。

由于腹水中单克隆抗体的产生通常会导致内源性宿主蛋白的污染,因此细胞培养对于小规模和大规模单克隆抗体的生产至关重要。 Abnova采用独有的细胞培养法制备细胞培养级抗体,与腹水和经典细胞培养相比,该方法可为客户提供高亲和力、高纯度且不受小鼠免疫球蛋白污染的抗体。