关于生物安全柜一些小知识

关于生物安全柜一些小知识

一、如何区分不同级别的生物安全柜？

生物安全柜是为操作原代培养物、菌毒株以及诊断性标本等具有感染性的实验材料时，用来保护操作者本人、实验室环境以及实验材料，使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性气溶胶和溅出物而设计的。

生物安全柜可分为Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级。

Ⅰ级生物安全柜可保护工作人员和环境而不保护样品。气流原理和实验室通风橱一样，不同之处在于排气口安装有HEPA过滤器。一级生物安全柜本身无风机。Ⅱ级生物安全柜是目前应用最为广泛的柜型。 与Ⅰ级生物安全柜一样，Ⅱ级生物安全柜也有气流流入前窗开口，被称作“进气流”，用来防止在微生物操作时可能生成的气溶胶从前窗逃逸。与Ⅰ级生物安全柜不同的是，未经过滤的进气流会在到达工作区域前被进风格栅俘获，因此试验品不会受到外界空气的污染。 Ⅱ级生物安全柜的一个独特之处在于经过HEPA过滤器过滤的垂直层流气流从安全柜顶部吹下，被称作“下沉气流”。下沉气流不断吹过安全柜工作区域，以保护柜中的试验品不被外界尘埃或细菌污染。因此，所有的Ⅱ级生物安全柜都可提供工作人员、环境和产品的保护。

Ⅲ级生物安全柜是为4级实验室生物安全等级而设计的，是目前世界上最高安全防护等级的安全柜。柜体完全气密，100%全排放式，所有气体不参与循环，工作人员通过连接在柜体的手套进行操作，俗称手套箱(Golve box)，试验品通过双门的传递箱进出安全柜以确保不受污染，适用于高风险的生物试验。

二、Ⅱ级生物安全柜的分类及选型有哪些？

Ⅱ级生物安全柜按排放气流占系统总流量的比例及内部设计结构，将其划分为A1、A2、B1、B2四个类型。

A1型安全柜前窗气流速度最小量或测量平均值应至少为0.4m/s。安全柜内70%气体通过高效空气过滤器过滤后再循环至工作区，30%气体通过排气口的高效空气过滤器排出。安全柜内的污染气流经过高效空气过滤器过滤后可以排到实验室或经安全柜的外排接口通过排风管道排到大气中。

A2型安全柜前窗气流速度最小量或测量平均值应至少为0.5m/s。70%气体通过HEPA过滤器再循环至工作区，30%的气体通过排气口过滤排除。安全柜内的污染气流经过高效空气过滤器过滤后可以排到实验室或经安全柜的外排接口通过排风管道排到大气中。安全柜的负压环绕污染区域的设计，阻止了柜内物质的泄漏。

B1型生物安全柜前窗操作口流入气流的最低流速为0.50m/s，柜内气体中30%气体通过高效空气过滤器过滤后再循环使用，70%气体通过排气口HEPA过滤器过滤后通过专用风道排入大气中。所有被生物污染的部位均应保持负压，或被负压的通道和负压通风系统包围。

B2型生物安全柜前窗操作口流入气流的最低流速为0.5m/s，柜内下降气流全部是由柜外供给，即安全柜排出的气体不再循环使用。柜内的气流经过滤后排入大气，不允许再进入安全柜循环或返流回实验室，可同时提供生物性和化学性的安全控制。所有污染部位均应处于负压状态或者被负压区包围。

三、生物安全柜检测依据什么标准？

生物安全柜检测现行的主要标准依据有：

（1）欧盟EN 12469：2000《Biotechnology-Peformance Criteria for Microbiological Safety Cabinets》

（2）美国NSF/ANSI 49—2002《Class II(Laminar Flow) Biosafety Cabinetry》；

（3）JG 170-2005中华人民共和国建筑工业行业标准《生物安全柜》；

（4）YY 0569-2011中华人民共和国医药行业标准《Ⅱ级生物安全柜》。

鉴于生物安全柜危险的使用环境，在安装时以及以后每隔一定时间，要由具有CMA检测资质与能力的第三方检验检测机构按照规定对每一台生物安全柜的整体运行性能进行性能检测，以检查其是否符合国家及国际的性能标准保证使用者的安全。

四、生物安全柜检测主要检测哪些指标？

生物安全柜检测主要包括物理学检测和生物学检测两个方面，根据检测性质可分为首次检测、后续检测。除生物安全柜的一年一度的常规检测外，下列情况之一时，如安装后、移动后、检修后、更换过滤器后，也必须进行现场生物安全柜检测。

按照《Ⅱ级生物安全柜》（YY0569-2015）、《生物安全柜》（JG170-2005）和《消毒技术规范》（2002年版）要求，Ⅱ级生物安全柜检测指标包括高效过滤器检漏、洁净度、下降气流流速、工作窗口进口平均风速、温升、气体流向、照度、噪声、振幅、紫外线灯强度。安装后、移动后、检修后、更换过滤器后还必须加测柜检漏和人员安全性、受度样本安全性和交叉感染。Ⅲ级生物安全柜还须检测静压差。

五、使用生物安全柜有哪些注意事项？

（1）超净工作台≠生物安全柜。超净工作台看似和生物安全柜非常相似，但超净工作台只保护工作区的样品免受外部环境污染，并不能保护操作人员。

（2）请勿使用生物安全柜处理有毒、易燃、易爆等材料。

（3）应避免使用明火。因明火产生的热效应会干扰生物安全柜操作区内的气流稳定，且火焰热气会影响滤器的寿命。如必须使用，可根据需要选取即用即燃式灭菌器具或微型接触式燃烧器。

（4）请勿在生物安全柜内摆放过多物品，否则会影响安全柜气流和安全性能。

（5）合理选择生物安全柜的安装地点。应当尽量远离外部气流干扰因素，例如门窗、空调通风口、人员过道以及其他实验室气流干扰设备（安全柜、通风橱等）。

（6）生物安全柜中一般不需要紫外灯。如果使用紫外灯的话，应该每周进行清洁，以除去可能影响其杀菌效果的灰尘和污垢。

（7）在安全柜使用前后，请按照程序为安全柜进行表面除菌。使用适当的消毒剂，例如70%的异丙醇溶剂擦拭安全柜的工作区表面，包括前后的近期格栅。

（8）注意安全柜自净周期。开启关闭安全柜时，让安全柜自主运行3-5分钟的自净周期。这个自净程序可以清除安全柜的工作区域内可能存在的经空气传播的污染物。

（9）确保安全柜在工作时前窗处于正确的额定操作高度。

（10）正确着装为操作中提供必要保护。当进行高危险性操作，例如生物安全水平2+到3级操作时，应选用长袖、背面开口的隔离衣和两副手套，并确保外层手套套住隔离衣袖口。不能有暴露在外的肌肤。

（11）在安全区域内进行操作。切勿阻塞工作区前后的通风格栅。尽量在工作区的中心部位进行操作。

（12）遵循清洁区到污染区的操作原则。生物安全柜的工作区应该被依次划分为三个区域：清洁区、工作区和污染区。生物危害性废弃物袋应放置在污染区内；实验仪器和样品应放置在工作区域；而实验供给品应放置在洁净区内。在工作台面上的实验操作应该按照从清洁区到污染区的方向进行。

六、如何判断高效过滤器需要更换?

（1）风速变小。当检测发现洁净度指标正常、下降气流或流入气流流速变小时；或者设备在运行过程中，若设备发出声光报警且是因下降气流或流入气流流速低造成的(显示窗口分别所显示数值低于设计要求)说明过滤器堵塞己十分严重，风机转速己达到最大值，系统无论如何调整都无法达到规定的风速值，此时必须更换过滤器。

（2）压力传感器报警。当压力指示器显示值大于170Pa时报警系统报警。

（3）检测高效过滤器完整性发现有泄漏。

（4）气流模式改变时。通过检测发现，垂直气流（下降气流）出现死角和回流，有烟雾从柜内泄漏出来，或进入柜内的烟雾有外逸时。

（5）控制面板上的风机累计运行时间，如果达到10000小时，通常需要更换过滤器，但不是必须更换，还要考虑使用环境的洁净程度，使用习惯等。