生物安全柜的分类与使用指南

生物安全柜是为操作原代培养物、菌毒株以及诊断性标本等具有感染性的实验材料时，用来保护操作者本人、实验室环境以及实验材料，使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性气溶胶和溅出物而设计的。

今天我们将从使用原理、类别、功能等多个角度聊一聊生物安全柜的那些事儿。

作用

防止操作者和环境暴露于实验过程中产生的生物气溶胶的负压过滤排风柜，是防止实验室获得性感染的主要设备。

工作原理

将柜内空气向外抽吸，使柜内保持负压状态，通过垂直气流来保护工作人员；外界空气经高效空气过滤器过滤后进入安全柜内，以避免样品被污染；柜内的空气也经过过滤器的过滤后再排到大气中，以保护环境。

生物安全柜的分类

1一级生物安全柜

可保护工作人员和环境而不保护样品，其气流原理和实验室通风橱基本相同，不同之处在于排气口安装有HEPA 过滤器，将外排气流过滤进而防止微生物气溶胶扩散造成污染。一级生物安全柜本身无风机，依赖外接通风管中的风机带动气流，由于不能保护柜内产品，目前已较少使用。

2二级生物安全柜

目前应用最为广泛的柜型，按照《中华人民共和国医药行业标准YY0569-2005生物安全柜》中的规定，二级生物安全柜依照入口气流风速、排气方式和循环方式可分为4个级别：

A1型，A2型，B1型和B2型，所有的二级生物安全柜都可提供工作人员、环境和产品的保护，A1型安全柜前窗气流速度最小量或测量平均值应至少为0.38m/s。无内部循环气流，100%的气体通过排气口过滤排出。

A2型安全柜前窗气流速度最小量或测量平均值应至少为0.5m/s。70%气体通过HEPA过滤器再循环至工作区，30%的气体通过排气口过滤排出。

二级B型生物安全柜均为连接排气系统的安全柜：连接安全柜排气导管的风机连接紧急供应电源，目的在断电下仍可保持安全柜负压，以免危险气体泄漏如实验室。其前窗气流速度最小量或测量平均值应至少为0.5m/s(100fpm)。

B1型70%气体通过排气口HEPA过滤器排除，30%的气体通过供气口HEPA过滤器再循环至工作区。

B2型为100%全排型安全柜，无内部循环气流，可同时提供生物性和化学性的安全控制，可以操作挥发性化学品和挥发性核放射物作为添加剂的微生物实验。3三级生物安全柜

为生物安全防护等级为4级实验室而设计的，柜体完全气密，工作人员通过连接在柜体的手套进行操作，俗称手套箱（Golve box），试验品通过双门的传递箱进出安全柜以确保不受污染，适用于高风险的生物试验，如，进行SARS、埃博拉病毒相关实验等；

根据生物安全柜的强制性行业标准规定，只有获得国家食品药品监督管理局颁发的三类医疗器械注册证的产品才能真正保护操作人员、实验室环境和操作样本；生物安全柜提供对人/样品及环境的三重保护。

生物安全柜的使用

1.安装：确保安全柜与外部排风系统压力平衡，保证安全柜处于正常工作状态

2.维护：定期维护和检测，确保安全性

3、制定计划：工作前认真理解操作步骤和所需设，尽量减少扰动，准备好消毒剂

4、开始：关紫外灯，前窗开至适当高度，打开安全柜的灯和风扇；检查出风口是否有障碍物，等待5min；用消毒液彻底洗净手和手臂；穿长袖工作服和手套；带防护眼镜

5、清洁：用70%的乙醇或适当的消毒剂擦拭工作区域内壁

6、上样：只放入所需物品，不能超载；出风口不要有障碍物，大物体间要保持一定距离；前窗降至适当高度，2-3min以吹扫污染物

7、最后的吹扫：工作结束，继续开机10-15min 

8、下样：与污染物接触的物品，取出之前必须经表面去污处理，所有托盘或容器取出前必须加盖

9、清洁：用消毒剂清洁内壁，待其干燥；定期抬起工作面清洁下面的区域。

10、技巧：

•所有物品离前窗至少2英寸，所有污染性的操作尽量远离工作区域的后部

•干净的与污染的物品分开放置；污染物品尽量放置在工作区域后部

•操作时物品和手臂不要穿过前窗

•避免使用明火，用适当的灭菌措施•避免使用干扰安全柜内层流的实验手段

•安全柜处于操作状态时，彻底消毒内壁

生物安全柜的操作注意事项

操作者：生物安全柜如果使用不当，其防护作用就可能大大受到影响。

紫外灯：生物安全柜中不需要紫外灯。如果使用紫外灯的话，应该每周进行清洁，以除去可能影响其杀菌效果的灰尘和污垢。

明火：在生物安全柜内所形成的几乎没有微生物的环境中，应避免使用明火。

溢出：实验室中要张贴如何处理溢出物的实验室操作规则，每一位使用实验室的成员都要阅读并理解这些规程。

清洁和消毒：由于剩余的培养基可能会使微生物生长繁殖，因此在实验结束时，包括仪器设备在内的生物安全柜里的所有物品都应清除表面污染，并移出安全柜。

除污染：生物安全柜在移动以及更换过滤器之前，必须清除污染。