On-chip分选流式对非小细胞肺癌患者CTC细胞分析和分离研究

非小细胞肺癌(nonsmall‐cell lung carcinomas,NSCLC)约占所有肺癌的80%,并且大多数患者发现时已处于中晚期,5年生存率很低。对于NSCLC,靶向治疗是临床上一种理想的治疗方式。表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)是目前治疗NSCLC的一个重要靶点,然而相关靶点药物如EGFR酪氨酸激酶抑制剂有可能导致肿瘤细胞的耐药性突变。因此,实时监测突变在治疗过程中十分必要。传统活检方法无法用于实时监测,而可视作肿瘤组织替代品的循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTC)有着实现实时监测的潜力。

 

关于CTC细胞检测,CellSearch系统是唯一的美国 FDA批准的CTC计数系统,但是它仍然难以用于NSCLC患者CTC的分析。近日,日本科学家借助On-chip Sort流式分选仪在Cancer Science杂志上发表了有关NSCLC患者CTC细胞检测的文献《Isolation and molecular analysis of circulating tumor cells from lung cancer patients using a microfluidic chip type cell sorter》。研究认为,使用On-chip Sort是检测和捕获NSCLC患者CTC细胞的有效方法。

首先,研究人员将不同数量的各种肿瘤细胞系混合掺入血液中,并使用On-chip Sort检测并分离CTC细胞。分离得到CTC细胞中,EGFR突变的检测成功率为100%。之后,研究人员采集了30个NSCLC患者的外周血,并使用On-chip Sort和CellSearch以盲目的方式计算CTC细胞数量。结果显示,30名患者中有22名(73.3%)患者使用On-chip Sort确定为CTC阳性,但只有9名(30%)使用CellSearch系统确定为CTC阳性。并且对这9例CellSearch确认为阳性的患者,On-chip Sort也确认为阳性。说明在NSCLC患者CTC细胞检测中,On-chip Sort比CellSearch系统有更高的灵敏度,一些无法通过CellSearch检测到的CTC细胞可以使用On-chip Sort检测到。


此外,研究人员使用荧光显微镜观察了On-chip Sort分选捕获的细胞(这些细胞在分选之前已经标记了靶向肿瘤细胞标志物的荧光抗体 )。结果显示,分选得到的细胞与肿瘤标志物荧光抗体结合,说明分选得到的是CTC细胞。

 

总结:

On-chip Sort可以准确分离捕获NSCLC患者的CTC细胞,且可用于后续的肿瘤细胞DNA检测,以实现EGFR突变的实时监测。此外,基于On-chip Sort的CTC细胞分析方法在细胞形态学分析、免疫细胞化学、荧光原位杂交检测等方面提供了独特的优势。最重要的是,此方法可用于评估EGFR蛋白表达水平的变化,在NSCLC患者CTC细胞诊断方面有着很大的临床潜力。

关于On-chip Sort流式分选仪

 

 

技术革新

● 创新:采用微流控ZL技术;

● 无损伤:低压气体推动分选;

● 零污染:一次性芯片全封闭,无临床污染;     

● 无限制:分选时对鞘液没有要求(可使用海水、培养液、油等);

应用领域

● CTC分选与鉴定;

● 神经细胞分选与鉴定;

● 细菌、微生物、霉菌分选与活力测定;

● 精子分选;

● 血细胞分选与鉴定;

● 干细胞研究(iPSES细胞);

● 药物机理研究;