发布时间:2020-05-19 14:48 原文链接: 高通量彗星电泳仪与传统彗星电泳仪的比较

彗星实验高通量实验过程的新方法

单细胞凝胶电泳,或者我们称之为彗星实验,作为研究DNA损伤的形成和修复,吸引了越来越多研究者的兴趣。此外,彗星实验不再局限于应用在院校和科研机构。现在,越来越多的相关工业企业对彗星实验有了显著的兴趣,例如制药企业中的遗传毒性药物筛选。事实上,彗星实验为医药行业的推进和发展提供了巨大的动力。

不论用什么方法做彗星实验,这几个步骤都是必须需要的(如图1).其中载玻片是实验的基础原件,把含有细胞的琼脂糖凝胶,用盖玻片封存在载玻片上,用以后续操作。这些小而薄的琼脂糖凝胶十分脆弱,在每一次操作的步骤中都有被损坏的危险,从而危及试验的成功。也浪费了宝贵的时间,最为一个典型的彗星实验,可能需要40个载玻片试样进行试验,把它们放在一个大尺寸的电泳槽中,进行彗星实验。能同时运行40个载玻片的电泳槽尺寸,常常成为一个很难解决的问题,通常情况下,这个电泳槽的尺寸要达到33*59cm,为了给它进行冷却,冷却槽的尺寸必须要更大,要达到60*75cm。这将占用很大的地方,不方便进行试验。

通常情况下进行一次彗星实验差不多要占用3天的时间,去量化DNA的损坏程度。随着高通量技术的发展,很明显彗星载玻片的处理过程成为整个彗星实验的瓶颈。到现在为止没有更好的办法去提高彗星载玻片的操作过程,从而提高彗星实验的效率。北京兴联商贸有限公司提供一款新式彗星电泳槽系统,较少了电泳槽的占地尺寸,同时提高了整个彗星实验的处理速度。整个电泳槽系统配备两个载玻碟,每个载玻碟上可以放置25个载玻片。这种设计不仅降低了载玻片上凝胶被破坏的风险,同时也提高了彗星实验的速度。

左面为传统的彗星电泳槽,占地面积大,需要更大尺寸的冰桶进行冷却。右面的使我们提供的高通量彗星电泳仪。占地面积小,底层带有冷却槽,不用配置冰桶进行冷却。

方法

材料:通过我们特制的高通量载玻架(如图),可以同时运行25个彗星实验载玻片试样。该载玻架设有凹槽,载玻片可以插入凹槽,竖直放置。载玻架可以完全放置在我们的彗星电泳槽中(见图片)。

过程:在载玻片上把试样细胞形成固定的琼脂糖凝胶层,通过大约一整夜的时间进行裂解,形成所需的彗星电泳试样。传统的方法是,逐个放在电泳槽底部,进行电泳,然后把电泳过后的载玻片取出,再进行后续的染色,中和,洗涤等过程。每个载玻片都需要处理,不仅浪费时间,同时载玻片上的凝胶层也容易在迁移的过程中遭到破坏,从而影响实验结果。我们新设计的高通量电泳槽很好的解决了这个问题。所有制作好的载玻片全部竖直插入载玻架上,该载玻架可以整体放入高通量电泳槽内进行电泳。电泳完成后,无需逐个取下载玻片。我们会提供清洗盒,染色盒,中和盒进行后续操作,是载玻架可以整体放入各个盒体中,提高了试验效率,同时降低了试样被破坏的风险。

引用资料

1.Novel method for the high-throughput processing of slides for the comet assay Nature.2014-11-26[引用日期2016-11-14]


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