连接于二抗的标记物是为了检测抗体的结合，选择标记物依赖于几个参数：
检测方法：
荧光或着色沉淀，荧光标记物用特殊波长的光激发时发射出可见光
封片介质（仅免疫组化）：
AEC, Fast Red, INT 或其它水性发光基团是可以醇溶的并要求水性封片. 除上述之外的发光基团是有机的所以最好使用有机性封片介质。
荧光素标记物要求水性封片介质，藻红蛋白(藻青素 / 藻红素要求不添加甘油的水性封片介质，因其有淬灭荧光的效应，
生物素化的抗体：
通常用于加强亲和素-生物素-酶或荧光素复合物（ABC试剂或亲和素或链霉亲和素连接酶或荧光素的信号）