通过cDNA宏阵列和基因表达谱检测环境毒物的毒理效应...

实验步骤

一.材料

1.扩增和制备克隆

（1）甘 油 保 存 的E.coli, 质 粒 含 有 目 标 cDNA 插入片段。

（2）Tag 聚合酶和缓冲液（New Englang Biolabs cat. no. M0267)。

（3）10 mmol/L dNTP 混合物。

（4）用来扩增载体中插入片段的引物稀释到 10 μmol/L (M13、 SP6、 T4 或 T7 为常用引物）。

（5）不含核酸酶的水配制的 7 0 % 乙醇。

（6）Tris-EDTA 缓冲液： 10 mmol/L T ris， lmmol/L E D TA ， pH 8.0。

（7）普通 96 孔圆底培养板。

（8）96 孔板培养用封贴（breathe easy strips， USA Scientific cat. no. 9123-6100)。

（9）L B 培养基：每 升 l0g 胰蛋白胨， 5 g 酵母提取物， 10g NaCl， pH 7.0。