钾离子对气孔开度的影响实验

实验方法原理 气孔是陆生植物与外界环境交换水分与气体的主要通道及调节机构。它既要让光合作用需要的CO2通过，又要防止过多的水分损失，因此气孔在叶片上的分布，密度，形状，大小以及开闭情况显著地影响着叶片的光合，蒸腾等生理过程。在研究化学物质及因素对气孔运动的影响时，经常需要观察或测定气孔开闭的程度。气孔运动 (stoMatal  MovMent)和保卫细胞积累K+有着非常密切的关系，光合磷酸化形成ATP，保卫细胞质膜上具有光活化H+泵，H+泵水解ATP，利用释放能量将H+分泌到细胞壁，内向K+离子通道开启， 外边的K+转移进保卫细胞，从而降低保卫细胞水势，吸水膨胀，使气孔张开。本实验通过人为的增加K+浓度观察气孔的变化。光下植物叶片的气孔开启，暗中气孔关闭。气孔的形态，大小及气孔开度也可在显微镜下直接观察。

实验材料 蚕豆叶片

试剂、试剂盒 KCl Tris一HCl缓冲液

仪器、耗材 显微镜镊子盖玻片载玻片刀滴管液管培养皿

实验步骤

1. 取4个培养皿编号，取其中2个分别配制成250 M M 、5O MM KCl溶液2  ml （用 Tris－HCl缓冲液稀释）；取另外2个培养皿分别加入2  ml  Tris－HCl缓冲液待用。

2. 撕2－3 MM 2的蚕豆叶表皮分别放入上述4个培养皿中，每个培养皿中放3-4片。

3. 将上面所做的1个装有Tris－HCl缓冲液的培养皿放入实验台的抽屉里避光放置1.5 小时，其余3个放在日光灯下照光1.5小时。

4. 分别取出不同处理的叶表皮放在载玻片上，加盖玻片，在显微镜下观察气孔的开度。

注意事项

观察比较不同处理的表皮气孔张开的情况，说明原因。