一、PCR操作范例
在一个典型的PCR反应体系中需加入：适宜的缓冲液、微量的模板DNA、4×dNTPs、耐热性多聚酶、Mg2+和两个合成的DNA引物。模板DNa 94℃ 变性1min，引物与模板40～60℃退火1min，72℃延伸2min。在首次循环前模板预变性3～5min；在末次循环后，样品仍需继续延伸3～5min以上，确保扩增的DNA为双链DNA。为便于了解PCR反应中各成份的组成，加入量和反应条件，使人们以此为基础，对不同的研究对象逐项改变来找到最佳反应条件，特列举Perkin Elmer Cetus公司Gene Amp DNA试剂盒提供的典型反应条件供参考。
表22-1 PCR反应混合液
| 成分 | 加入体积（μl） | 最终浓度 |
| 双 蒸馏水 | 53.5 | |
| 10×反应缓冲液[1] | 10.0 | [1×]Mg2+1.5mmol/l K+50mmol/L |
| 4×dNTPs(各1.25mmol/L) | 16.0 | 各200μmol/L |
| λ-DNA模板（全长48.5kD） | 10.0 | 1ng/次 |
| 引物1,2（各25bp,20μmol/L）[3,4] | 5.0 | 1.0μmol/L（100pmol） |
| Taq 聚合酶储存液[2] | 0.5 | 2U/100μl |
| 总体积（pH8.3） | 100.0 | |
| 石蜡油 | 50～100.0 |
扩增条件：94℃60s,37℃60s,72℃120s,共25～30个循环