蜂蜜是蜜蜂从开花植物的花中采得的花蜜在蜂巢中酿制的蜜。蜜蜂从植物的花中采取含水量约为75%的花蜜或分泌物,存入自己第二个胃中,在体内多种转化的作用下,经过15天左右反复酝酿各种维生素、矿物质和氨基酸丰富到一定的数值时,同时把花蜜中的多糖转变成人体可直接吸收的单糖葡萄糖、果糖,水分含量少于23%存贮到巢洞中,用蜂蜡密封。蜂蜜是糖的过饱和溶液,低温时会产生结晶,生成结晶的是葡萄糖,不产生结晶的部分主要是果糖。
5-HMF由葡萄糖或果糖脱水生成,分子中含有一个呋喃环,一个醛基和一个羟甲基,其化学性质比较活泼,可以通过氧化、氢化和缩合等反应制备多种衍生物,是重要的精细化工原料。
《中国药典》中采用液相色谱法分析检测蜂蜜中的5-HMF,作为测定蜂蜜含量的质量评价依据,实验以乙腈-0.1%甲酸为流动相,用鸟苷作为定位物质。
液相色谱系统(济南上地电子科技有限公司)由高压恒流泵与UV紫外检测器直接构成等度分析系统。使用专业工作站可以同时控制高压恒流泵、紫外检测器及恒温柱箱等,具备多元高压洗脱、波长扫描等功能。广泛应用于研究开发、医药检验、食品检测、化工分析、环境监测等众多分析领域。
样品准备:取样品1 g,置于烧杯中,精密称定,加10%甲醇适量溶解,并分次转移至50 mL量瓶中,精密加入鸟苷对照品溶液1 mL,加10%甲醇至刻度,摇匀即得。
实验步骤:精密吸取待测液10 μL进样,领取鸟苷对照品溶液,5-HMF对照品溶液各10 μL进样,用以确定样品色谱图中5-HMF及鸟苷的色谱峰,进行计算。
色谱条件:
色谱柱 | InertSustain AQ-C18(4.6×250mm,5μm) |
流动相 | 乙腈-0.1%甲酸(V/V,5:95) |
柱温 | 35℃ |
检测波长 | 284 nm,254 nm |
流速 | 1.0 ml/min |
进样量 | 10 μL |
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