2013年激光共聚焦扫描显微学最新进展学术研讨会在京召开

　　2013年3月19日，由北京理化分析测试技术学会和北京市电镜学会主办的2013年度激光共聚焦扫描显微学最新进展学术研讨会在北京北科大厦成功举办。本次研讨会以推动北京市及周边省市激光共焦扫描显微学的进步和发展，提高广大相关工作者的学术及技术水平，促进上述学科在生命科学等领域中的应用和发展为目的。邀请了来自清华大学、北京大学、北大医学部、生物物理所及国家纳米中心等科研院所的专家教授作前沿学术报告。另外还有来自蔡司公司、徕卡仪器、安道尔公司、GE公司以及奥林巴斯（中国）有限公司的应用工程师向在会人员展示了他们最新的产品技术。

2013年激光共聚焦扫描显微学最新进展学术研讨会场

　　本次研讨会的主持人是来自北京市军事医学科学院的张德添教授，他简单的介绍了一下本次会议的目的和流程，随后研讨会正式开始。

清华大学 祁海教授

　　来自清华大学的祁海教授作了《双光子在体成像技术与免疫细胞原位动态研究》的报告。

蔡司公司 张超工程师

　　蔡司公司的张超工程师作了《蔡司最新激光层照显技术在生物学中的应用》报告，主要介绍了一项新的显微技术，即激光层照显微镜(Lightsheet Z.1)，并介绍了它的成像原理、主要特点及其应用领域。

　　Lightsheet Z.1的光照光束(层照光束)只会照亮样本很薄的一层，因而起到保护样本其他部分的作用；并且它的成像光束与光照层成90度角，因此，Lightsheet Z.1能在最小的照明强度下获得最好的图像质量，尤其适合于活体样本的长期试验；基于CCD/sCMOS的图像采集，能够检测弱信号；可以提供模式生物的活体培养环境并能融合多角度成像，任意角度旋转样品，适合厚样品成像。Lightsheet Z.1可以应用到一下领域：斑马鱼、果蝇等模式生物的胚胎发育研究；胚胎组织发育的快速成像；组织培养的3D成像；海洋生物组织成像以及其他活体或固定的较大生物体。Lightsheet Z.1这给生物学家带来了在活体生物动态成像研究上的新方法。

北京大学 王世强教授

　　来自北京大学的王世强教授作了《心力衰竭细胞机制的显微成像研究》。

徕卡公司 吴立君博士

　　来自徕卡公司的吴立君博士作了《徕卡共聚焦显微镜新进展》的报告。分别介绍了Leica的HyD，MP，WLL，STED等的新进展。Lecia HyD是适用于各种用途的高灵敏探测器。它能为所有样本提供最佳的动态范围、高灵敏度提高细胞活性、高速成像、光子计数模式提供真正量化的实验结果、和快扫计数实现完美组合并且用户可自行选择。MP多光子显微镜新的镀膜计数提高了系统的通透性，特定的光学系统提供最大化的光子效率，光学系统的“4f”设计保证均匀的视场照明。The new WLL2采用的白激光技术，提供了高图像反差的光闸技术、高达同时8条可调谱线，3万亿个独特组合以及应用于FLIM和gSTED的脉冲激发光源等。

北大医学部 何其华老师

　　来自北大医学部的何其华老师作了《Confocal中F技术的应用与比较（FRAP，FRET，FCS和FLIM）》。何老师先主要介绍了F技术的四个应用FRAP（荧光漂白恢复）、FRET（荧光共振能量转移）、FLIM（荧光寿命成像）、FCS（荧光相关光谱）的特点及其应用。F技术应用的主要特点是蛋白质功能检测包括分子的运动特性以及分子之间相互作用。

　　FRAP和FLIP应用于活细胞，但其只适合检测运动速度相对较慢的分子。FCS/FCCS主要应用于单分子水平、高敏度，它也不适合运动慢或不动分子，易对样品产生光漂白且FCCS会受crosstalk影响。FRET单个固定细胞或活细胞原位生理环境下检测分子间直接相互作用，但FRET所受客观因素的影响太多，如待测分子浓度、光漂白等，因此重复性不够好。双光子+FLIM则可以对细胞中蛋白质的相互作用的发生给出精确定位。最后何老师还给出了F技术在FRET-FCS、TIRF-FCS、FLIM-FCS、Scanning-FCS的未来展望。

安道尔公司 邓小卫工程师

　　来自安道尔公司的邓小卫工程师作了《转盘式共聚焦最新进展》报告。首先介绍了转盘式共聚焦的特点，它能保持细胞活性（灵敏度）且能快速记录细胞信号变化（速度）。但其也有一些缺点如单张照片质量不如点扫描共聚焦、原生无FRAP/TIRF等功能等。而新的CSR-W1扫描头增加了新功能分别为Upconversion，生物医学光子学的新星、提供红外激光输入端口可轻易升级为upconversion或者MP系统并提供direct bypass模式，对于TIRF和宽场成像效果更好，几乎没有光损失。

　　转盘式共聚焦在最新的发展中，目前有着最新科技的扫描头CSU-W1、最灵敏快速的探测器、能精确同步控制、专利的脉冲激光系统并拥有者专业的软件及系统开放性。

生物物理所 徐平勇研究员

　　来自生物物理所的徐平勇研究员作了《荧光蛋白探针与超高分辨显微成像》报告。

GE公司 杨淑静工程师

　　来自通用电气（GE）公司的杨淑静工程师作了《高速超高分辨光学成像进展：DeltaVision OMX系统》报告。从2009年到2012年的发展中，OMX的功能也在逐渐提升和加强，如独有的光路设计：高光子效率、多通道同时成像；强大的成像功能包括3D-SIM快速超分辨成像，TIRF/定位显微镜：环状TIRF、荧光定位专有的混合模型算法；广角荧光成像、多达4个通道同时。具体3D-SIM工作的过程则是：利用一个3D结构的光图像从样本中获得更高分辨率的信息；利用标准染料和荧光蛋白；广阔的成像技术（不是共焦的）。OMX在1秒钟可产生135张图像，分辨率提升到原来的8倍。

　　DeltaVision OMX超高分辨率显微镜具有以下特点：高速的3D-SIM信号的发生器；先进的高速~200美国激光快门；硬件自动聚焦标准；6种激光器可选择，405，440，488，514，568，642；可选择4sCMOS或EMCCDs*相机。

国家纳米中心 戴陆如教授

　　来自国家纳米科学中心的戴陆如教授作了《超高分辨率荧光显微镜中的单分子定位算法》报告。戴教授的主要思想是：观察独立的单分子信号而不是所有的荧光团；信号源的识别和定位；重现检测到的分子坐标的超分辨率图像。

　　定位算法的主要步骤是：信号源的识别；定位；图像重现。

奥林巴斯公司 位鹏

　　来自奥林巴斯公司市场部的位鹏作了《奥林巴斯特殊镜头介绍》报告。报告中主要介绍了奥林巴斯的超级镜头组。分别介绍了60X超级色差校队镜头、硅油物镜、长工作距离高数值孔径物镜、多光子专用镜头和25X ScaIView系列镜头以及新TIRF镜头。

　　研讨会后，各专家教授与厂商工程师进行自由交谈，这次研讨会圆满的结束。