培养基为您介绍如何利用PEG介导动物细胞融合

　　细胞融合或细胞杂交是指真核细胞通过介导和培养基，两个或多个细胞合并成一个双核或多核细胞的过程。人工的细胞融合开始于20世纪50年代, 60年代到70代作为一门新兴的技术, 发展非常快, 应用范围也极为广泛, 除了同种类细胞间可以融合, 种间远缘细胞也能融合, 细胞与组织不同, 不排斥异类、异种细胞, 动物细胞如此，植物细胞也是如此。基因型相同的细胞融合成的杂交细胞称为同核体；来自不同基因型的杂交细胞则称为异核体。

　　利用PEG介导的动物细胞培养基融合，其实验原理到目前为止还没有完全定论。学者们一般认为，PEG改变各类细胞的膜结构，使两细胞相互接触部位的膜脂双层中磷脂分子发生疏散、进而使其结构发生重排，再加上膜脂双层的相互亲合以及彼此间表面张力的作用，引起相临的重排质膜在修复时相互合并在一起, 使两细胞的胞质沟通, 从而造成相互接触的细胞之间发生融合。

　　利用PEG介导细胞培养基融合, 其融合效果受以下几种因素的影响。1. PEG的分子量与浓度: 细胞融合效果与PEG的分子量及其浓度成正比；但PEG的分子量越大、浓度越高, 对细胞的毒性也就越大。为了兼顾二者，在实验时常常采用的PEG分子量一般为1000~4000，浓度一般为40~60%。2. PEG的pH值: 经验证，PEG的pH值在8.0~8.2之间融合效果zui好。3. PEG的处理时间: 处理时间越长，融合效果越好, 但对细胞的毒害也就越大。故一般将处理时间限制在1分钟之内。本实验中细胞培养基融合后无需继续培养, 故处理时间可适当放宽至数分钟。4. 融合时的温度: 由于生物膜膜的流动性与温度成正比，故细胞的融合效果也与温度成正比。因此，为了获得更好的融合效果, 在细胞可能承受的温度范围内可适当提高处理的温度。对于哺乳动物的细, 一般采用的温度为38~40℃。

用于脆弱拟杆菌群的分离培养 BBE Agar 类杆菌-胆汁-七叶甙（BBE）琼脂 250
用于军团菌的选择性分离培养(OXOID方法) BCYE Agar(Legionella Agar) BCYE 琼脂(Legionella 琼脂) 250
发酵蛋白胨                            250
用于念球菌的分离培养和计数培养基(OXOID方法) BIGGY Agar(Nickerson Medium) BIGGY 琼脂 250
用于尿液中微生物的选择性分离培养(OXOID方法) C.L.E.D Medium C.L.E.D 培养基 250
每支加入100ml C.L.E.D 培养基中 C.L.E.D Medium Supplement C.L.E.D 培养基添加剂 1ml*5支
用于淋球菌的分离培养(OXOID方法) GC Agar GC琼脂 250
用于双歧杆菌的分离培养 BLB Medium BLB培养基 250
用于从含革兰氏阴性菌的标本中分离培养革兰氏阳性菌 PEA Agar PEA 琼脂 250g
用于生产过程中无菌监测(Acumedia方法) Eugonic Agar 艾格琼脂 250
用于淋球菌的分离培养(Quelab方法) NTM Medium NTM 培养基 250
用于淋球菌的分离培养(Quelab方法) Thayer Martin Agar TM培养基 250
用于基因工程中酵母菌的发酵培养 YNB Medium YNB 培养基 100
培养基原材料，提供细菌生长氮源，含色氨酸 Tryptone 胰蛋白胨     250
干酪素胰酶水解而成，培养基原材料 Peptone from Casein 酪蛋白胨     250
培养基原材料，提供细菌生长所需的生长因子 Beef Extract Powder 牛肉浸粉    250
培养基原材料，提供细菌生长所需的维生素B族 Yeast Extract Powder 酵母浸粉    250
培养基原材料，培养基凝固剂 Agar Bacteriological 细菌琼脂粉    250
培养基原材料，含碳水化合物，提供细菌生长氮源 Peptone from Soybean Meal  植物（大豆）蛋白胨    200