人血白蛋白临床上主要用于治疗因失血、创伤及烧伤引起的休克、肝硬化或肾病引起的水肿和腹水。其蛋白含量按照《生物制品规程》侧定,既要测定总氮、又需侧定非蛋白氮,操作较麻烦、费时。从近几年积累的检验数据表明,人血白蛋白中非蛋白氮极微(一般在0.02一。.08mg/ml之间),对结果几乎无影响,可忽略不计。采用全自动定氮仪直接测定其蛋白含量,方法简便、快速,结果和半微量定氮法基本一致。
一、仪器与试剂:
仪器:DDY一3型全自动定氮仪(北京真空仪表厂)。
试剂:硼酸,氢氧化钠、硫酸铜、硫酸钾、硫酸、盐酸均为分析纯。
二、方法与结果:
1.全自动定氮仪测定法:精密吸取本品1ml于消化管中,加硫酸钾59、硫酸铜0.259、硫酸10ml于电炉上消化(同时做空白)。然后将消化好的样品置定氮仪上蒸馏、滴定、并打印出结果。
2.半微量定氮法:按《生物制品规程》(2979)操作。
3.回收率试验:为了考察仪器的准确性,做了回收率试验。即精密吸取硫酸钱标准液(1.魂mgN/ml)5ml、10ml、15ml、20:nl、25ml、3oml、4oml分别置于消化管中,然后在定氮仪上蒸馏、滴定,平均回收率(n二14)为99.75%,CV为l。21%。
4.测定结果见下表
三、讨论
1.通过对以上二种不同规格6批人血白蛋白含量的测定表明,用全自动定氮仪法与半微量定氮法结果基本一致。
2.从上表可看出,扣除和不扣除非蛋白氮对结果影响不大,是否可忽略不计有待进一步探讨。
3.本法直接测定较半微量定氮法(稀释后取0.sml)更加准确。
4.本法测定简便、快速(一份样品只需3~5分钟,尤其适于大批样品的测定。