关于淘汰尿胆红素碘环试验
淘汰尿中胆红素碘环试验的原因及替代方法
淘 汰 的 理 由
胆红素为红细胞破坏后的代谢产物，可分为未经肝脏处理的游离胆红素和经肝脏与葡萄糖醛酸结合形成的结合胆红素。游离胆红素不溶于水，在血中与蛋白结合，不能通过肾小球滤出。结合胆红素分子量小，溶解度高，可通过肾脏在尿中排出。正常人血中结合胆红素含量很低，因此尿中不能检出胆红素。但如血中结合胆红素增加，尿胆红素实验可呈阳性反应。尿胆红素定性与尿胆原定性、尿胆素定性三项实验统称“尿三胆”检查，它对由于各种病因引起的溶血性、肝细胞性、阻塞性和先天性非溶血性黄疸的鉴别诊断有重要的意义。尿胆红素定性检查多用有Rosin氏碘环法、Harrison氏法及试纸法；Rosin碘环法,在尿标本表层上加入碘液，后者与尿中胆红素作用氧化生成胆绿素，出现绿色环，为阳性反应。此试验反应较慢，敏感性差，判断结果时干扰因素多。此次卫生部令决定废除此项实验，推荐使用Harrison氏法和试纸法。
可 替 代 的 方 法
一、Harrison氏法
１、原理
当尿中加入氯化钡时，后者与尿中原来存在的硫酸根或磷酸根化合形成硫酸钡或磷酸钡。它们吸附尿中胆红素，经离心沉淀后，在沉淀物中滴加酸性三氯化铁试剂，使胆红素氧化成胆绿素而呈绿色反应。
２、试剂
（1）性三氯化铁试剂(Fouchet试剂) 称取三氯乙酸25g，加蒸馏水少许溶解，再加三氯化铁0．９g溶解后加蒸馏水至100ml
（2）100g／L氯化钡溶液和氯化钡试纸 将优质滤纸裁成10X18mm大小纸条，浸入饱和氯化钡溶液内(氯化钡30g，加蒸馏水-100ml)数分钟后，置室温或37℃温箱内待干，贮于有塞瓶中备用。
3、操作
（1）取尿液约5ml，加100g／L氯化钡溶液约2．5ml，此时出现白色混浊。或用氯化钡试条将一端浸入尿中，浸入部分至少30mm，5—10秒钟后，取出沉淀条，平铺于吸水纸上，吸去多余的尿液。
（2）将上述浑浊尿离心或用滤纸过滤，取离心沉淀物或过滤在滤纸上的沉渣(上清尿液可进行尿胆原检查)，加入三第化铁试剂数滴，呈绿蓝色反应者为阳性，否者为阴性。
如用吸附尿的氯化钡试纸，即可在浸没尿的沉渣上滴加酸性三氯化铁试剂2～3滴，呈绿蓝色为阳性，色泽深浅与胆红素含量成正比。
４、附注：
（1）本法较其他方法(如泡沫法、碘环法、试带法)敏感、准确。
（2）由于胆红素不够稳定，尤其于阳光照射下更易分解，故应于留尿后及时检测。
（3）如尿液：呈碱性反应，应加醋酸使成酸性。当加入氯化钡振荡后生成的沉淀不多时，可加入饱和硫酸铵1～2滴，再振荡混合，即有足够的沉淀生成。
（4）水杨酸盐和阿司匹林也能与Foμchet氏试剂发生反应，产生假阳性结果，
（5）当Foμchet氏试剂加入过多时，胆红素氧化过度，则生成胆黄素而不显绿色，而可被误认为阴性反应。因此Foμchet氏试剂只需加入2～3滴。
二、尿试纸法
1、原理
在试带胆红素测定膜块区内含有2.4.2一二氯苯胺重氮盐及缓冲剂等，反应原理为在强酸性介质中葡萄糖醛酸胆红声(直接胆红素)与2．4．2一二氯苯胺重氮盐起偶联反应而呈紫红色。根据测定的方式不同，分为目测法和仪器法。目测法是根据测带颜色的深浅，对照标准板判断结果。自动分析仪器用微电脑控制，用球面积分仪和双波长测定试剂带上颜色变化。颜色的深度则与尿液中欲测成份的量有关。试剂带中还有另一个垫——“补偿区”，作为尿液本底颜色，以对有色尿及仪器变化等因素产生的误差进行补偿。
2、操作方法
将试剂带浸泡于尿液中1秒钟，立即将其放于仪器比色槽内。试剂带上已产生化学反应的各种试剂垫被钨灯照射，其反射光被球面积分仪接收。球面积分仪的光电管被反射的双波长(通过滤光片的测定光和一束参考光)光照射，各波长的比例由检测项目决定。仪器按公式⑴自动计算出反射率，然后与标准曲线比较，自动打印出各种成分的结果。尿液中某种成分含量高，其相应试剂垫的反射光较暗，否则较强。
反射率；Tm：试剂垫对测定波长的反射强度；Ts：试剂垫对参考波长的反射强度；Cm：校准垫对测定波长的反射强度；Cs：校准垫对参考波长的反射强度。
3、附注
（1）仪器及试纸带的操作方法略有不同，应根据使用仪器或试纸带的说明书要求进行操作。
（2）试带应避光，保存于室温干燥处。注意失效期。
（3）尿中含有高浓度的维生素C(＞0．59／L)和亚硝酸盐时抑制偶氮反应，可出现假阴性结果。当患者接受大剂量氯丙嗪治疗以及尿中含有盐酸苯偶氮吡啶(泌尿道止痛药)的代谢产物时，可出现假阳性结果。
（4）试带在使用和保存过程中，不能接触酸碱物质和气体，也不能用手触摸试验区。
（5）尿标本应新鲜。