上海巴斯德所乙肝病毒持续感染小鼠模型研究获进展

　　5月7日，中国科学院上海巴斯德研究所肿瘤病毒课题组的研究论文Recombinant Covalently Closed Circular Hepatitis B Virus DNA Induces Prolonged Viral Persistence in Immunocompetent Mice（《重组乙肝病毒cccDNA在免疫健全的小鼠中诱导延长的病毒持续性感染》）在Journal of Virology 上在线发表。

　　我国是乙肝病毒（HBV）感染高发国家，目前有9000多万慢性感染者，严重影响了人类健康。共价闭合环状DNA（cccDNA）是HBV慢性感染的分子基础，但现有的抗病毒药物难以清除cccDNA，导致慢性乙型肝炎难以彻底治愈。由于HBV易感宿主仅限于人和黑猩猩等灵长类动物，且具有显著的嗜肝性特征，因此研究HBV病毒学和免疫学缺乏合适的实验动物模型。小鼠是理想的模式实验动物，但是不能被HBV感染。此外，尽管支持HBV细胞内复制和病毒粒子的释放，小鼠的肝脏细胞中并不能形成cccDNA。因此，建立基于cccDNA的HBV持续感染小鼠模型具有重要的科学意义。

　　研究人员将一段含有重组位点的外源内含子序列插入单拷贝的HBV基因组中，构建出cccDNA前体质粒（prcccDNA）。prcccDNA在重组酶Cre表达的情况下，在肝细胞中诱导HBV重组cccDNA（rcccDNA）产生。rcccDNA以微染色体的形式存在。通过尾静脉高压注射小鼠的方式，rcccDNA可在小鼠的肝脏细胞中迅速积累，并诱导完整、有效的细胞内病毒复制。研究表明小鼠体内的T细胞免疫反应被特异性激活但并不完全。研究人员进一步减少DNA注射剂量后，免疫系统则呈现出不应答状态，从而导致了一个显著延长的HBV血清学表现（9周），同时伴随肝脏持续性炎症损伤。此项研究首次在免疫健全的小鼠上建立了基于cccDNA的HBV持续感染，为HBV慢性病理机制和抗病毒治疗研究提供了重要的实验动物模型。

　　此项工作在蓝柯研究员、邓强副研究员的指导下，由博士研究生齐治华、李改云和课题组其他成员共同完成，得到国家自然科学基金、国家科技重大专项以及“973”计划等项目的支持。