中低压液相色谱柱的保护和再生

中低压液相色谱柱系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入中低压液相色谱柱内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来中低压液相色谱柱主要有进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统。

中低压液相色谱柱的保护：

1、流动相和样液都需用0.45um孔径的滤膜过滤。

2、加3～5cm保护柱。

3、进样阀进样。

4、用纯甲醇保存色谱柱，防止细菌生长。

5、防止过酸或过碱。

6、防止振动和逆向流动。

7、对硅胶基键合相，水溶液流动相的ph值不得超出2～8.5的范围，使用温度不宜过高。

8、中低压液相色谱柱在酸性或碱性条件下使用后，应依次用水和甲醇清洗。对暂时不用而需要较长时间保存的色谱柱，要用纯甲醇清洗。

9、中低压液相色谱柱两端用金属螺帽封闭，保存在干净的有机溶剂中。

中低压液相色谱柱的再生：

一般情况下，硅胶和ods等化学键合固定相再生是困难的。有时采用下述方法可能提高柱效。

1、由于杂质微粒等因素，使色谱柱上端固定相变色，柱效下降。这时，可仔细地将变色部分除去约3mm左右，再补充新的固定相。

2、当色谱柱吸附未被洗脱的成分时，柱效将明显下降，可选择合适的溶剂洗净。

3、当采用梯度洗脱时，色谱柱在重复使用前，用泵把几倍于柱体积的起始溶剂压经色谱柱，以重新建立起始的平衡来得到再生。