临床质谱培训第二弹：开发验证、质量管理与临床应用

　　分析测试百科网讯 2017年4月19日-21日，由复旦大学附属中山医院检验科主办、复旦大学生物科学研究院协办的“液相色谱-质谱技术临床应用培训班”在复旦大学附属中山医院独山厅举办。

液相色谱-质谱技术临床应用培训班现场

　　20日上午的培训主题是“液相色谱-质谱检测方法的开发验证与质量管理”，由徐汇区中心医院中心实验室主任李水军教授、美国宾夕法尼亚州立大学Milton S. Hershey医学中心病理核心参考实验室副主任朱玉胜教授、广州金域医学检验中心临床质谱检测中心副主任赵蓓蓓共同带来精彩的培训报告。

　　徐汇区中心医院中心实验室主任李水军带来题为《LC-MS/MS方法开发和优化》的精彩报告。

徐汇区中心医院中心实验室主任 李水军

　　据统计，临床LC-MS/MS的普及性在不断增加，临床使用质谱仪器可以改进医学实践质量，为患者提供更好的医疗服务。目前，LC-MS/MS的临床检验主要应用在新生儿筛查，药物中毒、滥用药物分析、止痛药物分析，治疗药物监测，内分泌分析，蛋白鉴定和定量，微生物检测（MALDI-MS）以及微量元素检测（ICP-MS）。

　　李水军详细介绍了LC-MS/MS的实验室定位，临床实验室开展LC-MS/MS的考虑因素。LC-MS/MS方法开发的基本流程包括目标分析物、文献检索、质谱方法、液相方法、样品处理、基质效应。质谱分析中的样品处理是很重要的过程，LC-MS的结果错误常常是由于样品预处理不当，导致样品信号的抑制或共存物的干扰。测定之前进行分离、纯化、浓缩是十分重要的。样品处理方法包括稀释、蛋白沉淀、超滤、液液萃取、固相萃取、涡流色谱、免疫亲和等。

美国宾夕法尼亚州立大学Milton S. Hershey医学中心病理核心参考实验室副主任 朱玉胜

　　美国宾夕法尼亚州立大学Milton S. Hershey医学中心病理核心参考实验室副主任朱玉胜带来题为《LC-MS/MS检测方法开发与验证的基本要求》的精彩报告，介绍了LC-MS/MS的相关指导文件，检测方法开发的基本步骤，检测方法验证的参数选择。

　　LC-MS/MS相关指导文件——C62-A指南是旨在减少实验室间临床LC-MS/MS检测方法开发与验证的差异，提出了LC-MS/MS检测方法开发与验证的标准方案。C62-A指南包括LC-MS仪器的重要特征，影响检测方法性能与效用的检测前因素，方法校准，方法开发过程中重要的分析变量，方法验证，质量评价与质量控制，临床检测项目开展后的监控。

广州金域医学检验中心临床质谱检测中心副主任 赵蓓蓓

　　广州金域医学检验中心临床质谱检测中心副主任赵蓓蓓带来题为《LC-MS/MS方法的质量管理》的精彩报告，包括质量管理的必要性和质量管理的控制措施。

　　赵蓓蓓首先介绍了LC-MS/MS方法临床运营流程、LC-MS/MS方法临床应用优势等，并指出LC-MS/MS临床应用面临技术本身和临床日常运行管理的挑战。

　　LC-MS/MS方法的质量管理包括以样本为中心的分析前质量管理（病人准备、标本正确采集、标本运送、标本拒收），以保障检测质量为中心的分析中质量管理（标本前处理、分析过程、室内质量控制、室间质量评价），分析后质量管理（检验结果的正确发出、检验样品的保存及处理咨询服务）。质量管理通过方法学控制和室间质评的实施方法来保障，而方法学控制包括方法验证、室内质控、期间核查、仪器比对、盲样考核。其中需要进行的仪器管理包括仪器校准与核查、仪器定期维护计划、仪器重大维护后验证、辅助设备管理等，还需进行常用试剂/耗材管理、色谱柱管理、环境管理、数据及系统验证。

　　报告指出，LC-MS/MS技术具有很高的敏感性和特异性，可对病患照护提供独特的贡献，该技术在临床检验应用过程中仍存在着诸多挑战。严格而规范的方法开发与验证过程对LC-MS/MS而言是非常重要的，基于LC-MS/MS的方法学控制、准确性评价、试剂、仪器等个性化、全过程的质量管理尤为重要。

　　20日下午的培训主题是“液相色谱-质谱检测方法的临床应用”，由上海交通大学医学院附属新华医院的韩连书教授，复旦大学附属中山医院检验科副主任郭玮教授，迪安诊断质谱中心负责人杜英华教授共同带来精彩的培训报告。

上海交通大学医学院附属新华医院 韩连书

　　上海交通大学医学院附属新华医院韩连书带来题为《质谱技术在遗传代谢病筛查、诊治及产前诊断中的应用》的精彩报告。

　　遗传代谢病是基因突变导致维持机体正常代谢所需的某些酶、受体或载体等功能降低或缺乏，导致机体内某些代谢物的正常代谢途径受阻，代谢底物增加，产物减少引起的疾病。遗传代谢病多为单基因遗传病，大部分属于常染色体隐性遗传病。

　　报告还介绍了遗传性代谢病的临床表现，遗传代谢病常规实验室检查异常，常规辅助检查等。遗传性代谢病特点即大部分遗传代谢病缺乏特异性临床特点或特异性常规检测指标，遗传代谢病发病年龄变化较大，大部分遗传代谢病危害较重，遗传代谢病诊断需要特殊的检测技术。遗传代谢病检测常用技术包括串联质谱技术，气相色谱质谱技术，基因突变检测，基因芯片检测，二代测序技术，酶活性检测，染色体检测。

复旦大学附属中山医院检验科副主任 郭玮

　　复旦大学附属中山医院检验科副主任郭玮带来题为《质谱技术在临床激素检测中的应用》的精彩报告。激素检测的理想方法：监测范围宽，特异性高-避免交叉反应，多物质分析-前体和代谢物。激素检测的特点包括：激素结合蛋白——去蛋白，生理浓度低——灵敏度，结构相似干扰物质——特异性，系列前体和代谢物——高效性。报告介绍了雌二醇检测、醛固醇、嗜铬细胞瘤、儿茶酚胺及其代谢产物检测的原理及特点，并列举了相关临床案例。报告还介绍了如何利用LC-MS/MS建立最佳切点及参考范围来检测MNs以及MNs在嗜铬细胞瘤诊断的应用。

　　报告最后总结道LC-MS/MS是检测小分子激素的重要检测方法，建立更多、更敏感、更特异的临床检测项目，软/硬件提升将推动LC-MS/MS更广泛的临床应用。

迪安诊断质谱中心负责人 杜英华

　　迪安诊断质谱中心负责人杜英华带来《药物相互作用引起药物中毒反应机理及其浓度检测》的精彩报告。最理想的给药是将正确的药物给正确的病人，在正确的时间配以精确的给药剂量。报告还介绍了P450酶在一些典型药物代谢中的作用，西柚汁对药物暴露的影响，服用硝苯地平后的药物代谢检测实例等。