发布时间:2019-04-06 22:03 原文链接: 乙酰胆碱受体显示细胞化学实验

乙酰胆碱受体分布于神经肌肉接头等处,蛇毒素可与之紧密结合,并连接过氧化物酶,通过化学反应可在电镜下观察到乙酰胆碱受体分布。

实验材料

组织样品

试剂、试剂盒

磷酸钾戊二醛KOH蔗糖焦锑酸钾锇酸

实验步骤

1. 组织切成约 1 mm3 的小块,用 0.09 mol/L 磷酸钾(或草酸钾)-3% 戊二醛(pH 7.3,用 0.1%~1% KOH 调 pH)固定 4 h 以上,4℃。也有人推荐固定早期用微波照射,以加速固定液渗入细胞内部(关于微波照射使用情况参见有关章节)。


2. 固定后用 0.09 mol/L磷酸钾(或草酸钾)-4% 蔗糖(pH 7.3)漂洗 2~4 h,换液 3 次。


3. 1.5%~2% 焦锑酸钾-1% 锇酸 4℃ 固定 2 h。


4. pH 10 的蒸馏水漂洗 3 次×10 min,以洗尽残留的焦锑酸盐。


5. 脱水、包埋同常规,切片,染色或不染色。

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