二代测序原理及应用

二代测序原理及应用如下：

一、原理

二代测序原理也就是文库构建，PCR产生的片段或基因组打断的片段两端需要添加接头修饰才能进行测序。

1、末端修饰。打断的片段是随机断裂，其末端可能是不平的。因此，建库第一步是补齐不平的末端。

2、添加接头。经过末端修饰后的DNA片段3’末端具有突出的A尾，而接头具有突出的T尾，可以使用连接酶将接头添加到DNA片段两端，形成“Y”形接头。

3、PCR扩增。添加了接头的DNA片段，可通过与接头互补的引物来扩增，富集文库。

二、应用

二代测序技术相对一代测序大大降低了测序成本并大幅提高了测序速度，应用非常广泛，如突变体的定位，寻找SNP位点，全基因组甲基化测序等。

二代测序技术在此次新型冠状病毒疫情防控中发挥了很大的作用，人们直接通过测序掌握了该“不明原因肺炎”的基因组序列，从而进一步研发出相关检测试剂，以助于人们快速地搜索和排除相关病例，对于我国快速有效地控制疫情具有重大的意义。