二手定量PCR仪基本技术资料详情

 　　二手定量PCR仪，由荧光定量系统和计算机组成，用来监测循环过程的荧光。与实时设备相连的计算机收集荧光数据。数据通过开发的实时分析软件以图表的形式显示。原始数据被绘制成荧光强度相对于循环数的图表。原始数据收集后可以开始分析。二手定量PCR仪的软件能使收集到的数据进行正常化处理来弥补背景荧光的差异。正常化后可以设定域值水平，这就是分析荧光数据的水平。

　　现在的二手定量PCR仪大都是用半导体制冷片来控制温度的，其通电后一面热另一面冷，反向电极则热冷面反向。半导体制冷片虽然是工业化生产，都几乎都是手工的生产的，因此每一片都有差别，大的生产商会根据用户的需要进行配对，如一台二手PCR仪要三片就三片配成大致相同的阻值。阻值一般是厂家写在每片制冷片上的（自己用万用表是量不准的，因为一通电其温度就变化，阻值就会改变）。

　　因此半导体片的质量会影响PCR仪的均匀性。一般大的生产厂家出厂时问题不大，但使用一段时间后，半导体片的性能会下降，但下降程度并不一致，则温度差别就表现出来了。

　　普通的PCR仪：把一次二手PCR仪扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪，叫传统的PCR仪，也叫普通PCR仪。如果要做不同的退火温度需要多次运行。主要是做简单的，对目的基因退火温度的扩增。该仪器主要应用于科研研究，教学，医学临床，检验检疫等机构。

　　梯度PCR仪：把一次性pcr扩增可以设置一系列不同的退火温度条件，通常12种温度梯度，这样的仪器就叫梯度PCR仪。因为被扩增的不同DNA片段，其zui适退火温度不同，通过设置一系列的梯度退火温度进行扩增，从而一次性PCR扩增，就可以筛选出表达量高的zui适退火温度，进行有效的扩增。主要用于研究未知DNA退火温度的扩增，这样节约成本的同时也节约了时间。主要用于科研，教学机构。梯度PCR仪，在不设置梯度的情况下也可以做普通二手PCR仪扩增。

　　一般二手定量PCR仪都是多片半导体，普通维修会只更换其中一片，这样就会造成新的跑得快，旧的跑得慢，温度差别就大了。如果每片半导体片下面都有各自的温度传感器，则可以补偿一些，如果是像AB的低端型号2720，4片半导体片只有一个温度传感器，则问题大了。当然更换半导体片后的装配也是技术性很强的活，不经过严格的培训是做不到家的。这也是为什么大厂一般不在现场维修，而是要返厂，并且是一次性更换一套半导体片，因此成本较高。