二氧化碳培养箱用途广泛,主要用来培养细胞、组织和某些特殊微生物,为它们提供一个良好的体外培养环境,广泛应用于细胞学实验、微生物学实验、组织学实验以及分子生物学实验。因此,二氧化碳培养箱的清洁维护尤为重要。
二氧化碳培养箱的常见污染
进入二氧化碳培养箱培养环境中,对细胞生存有害的成分和造成细胞不纯的异物都应视为污染。不同的污染物对细胞的影响也有差别,有的影响是长期、缓慢和潜在的,而有的则能在很短的时间内抑制细胞生长或杀死细胞。根据污染源不同主要可以分为:生物性污染、化学性污染、物理性污染和气溶胶污染。
1、生物性污染:
这是最常见也是危害最大的污染。如细菌、病毒、真菌,支原体等。这些污染源有可能是人为带入,或是细胞在放入二氧化碳培养箱前已经受污染,再或者是箱体本身没有消毒干净。体外培养的细胞自身没有抵抗污染的能力,而培养基中所加抗生素的抗微生物污染的能力也是有限的,因而细胞微生物污染一旦发生往往是无法挽救的。
2、化学性污染:
二氧化碳培养箱中许多化学物质都可以引起细胞污染。如细胞培养容器清洗过程中残留的洗涤剂、加湿器中未纯化的水、人为带入的液体或气体都可能成为化学性污染的来源。不同化学物质对细胞污染是不一样的,有的可能促进或抑制细胞生长,有的甚至杀死细胞。
3、物理性污染:
培养环境中的物理因素,如温度、放射线、振动、辐射(紫外线或荧光)会对细胞产生影响。物理性污染常常被人们所忽视,其主要是在代谢水平或分子水平上,影响细胞正常的生理过程。
4、气溶胶污染:
气溶胶是液体或固体微粒均匀地悬浮在气体介质中的分散体系,当微粒是微生物时,就是微生物气溶胶,如果这种微生物是病原性的,就是病原微生物气溶胶。细菌、病毒等病原体通过气溶胶可在人与人、人与环境之间传播。
二氧化碳培养箱污染防控措施
1、二氧化碳培养箱的选择:
二氧化碳培养箱的制造商们设计了多种不同的装置去减少和防止污染的发生,其主要是防污染设计和消毒灭菌系统的改进,以达到消毒灭菌的目的。如带有紫外消毒功能的二氧化碳培养箱、带HEPA过滤器净化空气的二氧化碳培养箱,以及带高温灭菌的二氧化碳培养箱等,后者又分为高温干热和高温湿热两类。这些装置的灭菌能力各有千秋,紫外灯消毒范围有限,距离灯越远,或者被遮挡,消毒能力越差。
HEPA过滤器的过滤膜孔径有限,无法去除病毒和一些微小细菌,并且容易损耗,也有其局限性。相比而言,高温灭菌则是比较有效的方法。而高温干热和高温湿热也有所不同,不同方法的灭菌效率与温度的高低也有着直接的关系。
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