人单核／巨噬细胞的表型检测

基本方案

材料

待 测 单 个 核 细 胞（肝素抗凝血或肝素抗凝骨髓）或 外 周 血 单 个 核 细 胞（单 元 8.1)或者单核/巨 噬 细 胞（单 元 8. 5 , 推荐采用阴性分选）

PBS

PBS/肝素：含 0.1% (V/V ) 肝 素 的 PBS

阻 断 IgG，浓 度 3 mg/ml (如正常小鼠 IgG， Caltag)

荧光素标记的单克隆抗体（表 6. 3. 2)

E M A (Ethidium monoazide) 溶液

A C K 裂 解 液（新鲜配制，室温保存应< 1 2 h)

7 2 % (m /V ) 甲醛

12m m X 75m m 试管

15m l 锥 底 塑 料 离 心 管（Falcon)

低 功 率 白 炽 灯（如 40W 白炽灯）

Sorvall R T 6000B 离心机和转子

la. 使用肝素抗凝血或抗凝骨髓时：在 15m l 锥底塑料离心管中加入约 IOml 抗凝血或1〜3ml抗凝骨髓， 4℃， 1500g离心 3min。弃血 浆 ，加入 1 〇ml PBS/肝素，盖紧。